Avances en el desarrollo de una vacuna contra la encefalitis equina Venezolana mediante bioingeniería de partículas ?tipo virus? y proteínas superficiales de giardia lamblia.

FASSOLA, LUCIANA A; ALBRIEU-LLINÁS, GUILLERMO; OMS, SERGIO R; RUPIL, LUCIA L; SERRADELL, MARIANELA C

Congreso; XIII CONGRESO ARGENTINO DE VIROLOGÍA 2021; 2021

Sociedad Argentina de Virología

El virus de la encefalitis equina Venezolana (VEEV) es un arbovirus zoonótico de granimpacto sanitario y económico, capaz de causar cuadros febriles y neurológicos en equinosy humanos. La única vacuna aprobada para equinos en países con circulación endémica esla TC-83 y consiste en partículas infectivas atenuadas obtenidas a partir de una cepaepizoótica. Entre sus desventajas se destacan la posible reversión al fenotipo virulento y lapropagación en la naturaleza. En nuestro instituto se desarrolló una estrategia devacunación basada en partículas similares a virus (virus-like particles, VLPs) decoradas conproteínas de superficie de Giardia lamblia (Variant-specific Surface Proteins, VSPs). Estaplataforma combina la inmunogenicidad de las VLPs con las propiedades adyuvantes yprotectivas de las VSPs. Como objetivo nos propusimos obtener una vacuna segura yefectiva montando los antígenos inmunodominantes del VEEV en este sistema y demostrarasí su adaptabilidad con diferentes modelos virales. En primer lugar, amplificamos los genesque codifican las glicoproteínas de interés de la cepa vacunal TC-83 y luego los clonamos envectores de expresión para células eucariotas. Con los plásmidos obtenidos transfectamosdiferentes líneas celulares y verificamos su expresión mediante inmunofluorescencia yWestern blotting. A su vez, para la inmunodetección generamos suero policlonal de ratonesinfectados con la cepa vacunal. Además, produjimos de manera recombinante la proteínaE2 con un tag de histidina, para generar anticuerpos exclusivos contra este epítopo. Para laproducción de VLP-VSPs co-transfectamos una línea celular que expresa establemente ensu membrana la VSP, con dos plásmidos: uno que expresa el antígeno viral y el otro, laproteína Gag del virus de leucemia murina que permite el ensamblado de las VLPs.Actualmente estamos caracterizándolas y luego evaluaremos su efectividad comoinmunógeno en modelo murino y su utilidad para el diagnóstico serológico.