Desarrollo de una vacuna a subunidades para la prevención de la infección con el virus Zika.

LUCIANA A. FASSOLA; GUILLERMO ALBRIEU-LLINÁS; LUCIA L. RUPIL; DAMIÁN O. PERALTA; MARIANELA C. SERRADELL

Valle hermoso, Córdoba

Encuentro; Reunión científica anual SAV 2022; 2022

Asociación Argentina de Microbiologia

En nuestro grupo estamos trabajando en el desarrollo de diferentes vacunas en base a un sistema que combina la alta inmunogenicidad y plasticidad de las partículas similares a virus (VLPs), con las propiedades inmunoestimulantes y de resistencia de proteínas derivadas del parásito intestinal Giardia lamblia (Proteína variables de superficie-VSPs). En este sistema VLP-VSP producimos partículas pseudovirales mediante la expresión de las proteínas Gag del virus de la leucemia murina-MLV. Estas partículas a su vez transportan, en su envoltura, las VSPs y el/los antígenos virales. Anteriormente demostramos que la plataforma VLP-VSP tiene gran capacidad para inducir una respuesta inmune robusta contra el virus Influenza luego de la administración oral . De manera similar, el efecto adyuvante por la vía subcutánea fue muy potente. Hasta el momento no existen tratamientos antivirales ni estrategias de inmunización contra Zika, lo que nos motiva a aprovechar las propiedades de la plataforma para generar una vacuna capaz de prevenir esta infección. En una primera instancia clonamos la porción extracelular de la glicoproteína E de la envoltura del virus Zika (antígeno vacunal) fusionada al transmembrana del Virus de Estomatitis Vesicular-VSVg, ya que su interacción con las proteínas Gag-MLV favorece el ensamblado de VLPs. Luego expresamos exitosamente esta proteína en las VLP-VSPs por co-transfección con los plásmidos pGag y pEZIKV en una línea celular HEK que expresa establemente una VSP de G. lamblia (VSP1267) en su superficie (línea Flp-In1267 desarrollada en el laboratorio), lo cual se confirmó por Western Blot mediante anticuerpos específicos (anti-VSVg y anti-E de Zika). Finalmente, a través de un ensayo piloto inmunizamos ratones Balb/c tanto por vía oral como subcutánea con las VLP-VSP-EZIKV. A través de la determinación de anticuerpos anti-ZIKV mediante ELISA pudimos validar tanto la correcta conformación de la proteína E de Zika en la VLP-VSP así como la inmunogenicidad de las partículas, ya que las mismas fueron capaces de inducir una específica respuesta humoral en los animales vacunados. Ante estos resultados, tenemos previsto como siguiente paso realizar un ensayo definitivo de inmunización, titular anticuerpos neutralizantes, así como realizar una caracterización de la respuesta inmune generada.