Diferencias en el sistema de reparación de bases no apareadas del ADN entre E. coli y P. aeruginosa

BARRA, J. L.; SAAVEDRA PONS, A; JACQUELÍN, D. K; ARGARAÑA, C. E.

Viña del Mar, Chile.

Congreso; Reunión Iberoamericana de Bioquímica, Biología Molecular y Biología Celular.; 2000

La deficiencia del sistema de reparaciòn de bases no apareadas del ADN ha sido asociada con la adquisiciòn de patogenicidad y resistencia a distintos antibióticos en bacterias. En E. coli la reparación del ADN se inicia con la unión de MutS al heteroduplex. Posteriormente MutL y MutH interaccionan con MutS formando un complejo. MutH es una endonucleasa que degrada la hebra que contiene la mutación, la cual es discriminada de la hebra molde mediante la hemi-metilación de adeninas en las secuencias GATC (metilación "Dam"). Nuestro interés es investigar este sistema de reparación en Pseudomonas debido a que son conocidos patógenos de plantas, animales y humanos, adquieren con facilidad resistencia a antibióticos y poseen una amplia versatilidad metabólica. Utilizando enzimas de restricción observamos que P. aeruginosa no posee metilación del tipo "Dam" y además, en su genoma no hay secuencias con homología a MutH. La incorporación de un plásmido conteniendo el gen MutS de P. aeruginosa (clonado en nuestro laboratorio) complementa el fenotipo hipermutador de una cepa P. aeruginosa, pero no de E. coli, en las cuales este gen fue eliminado. La proteína producida a partir del plásmido es de mayor peso molecular que el de la proteína endógena en la cepa wt, y su expresión en la cepa wt resulta en la desaparición de la proteína endógena. Estos resultados preliminares sugieren que al menos algunos aspectos del funcionamiento y regulación de este sistema de reparación del ADN son particulares en Pseudomonas.