Formulación y caracterización de nanocápsulas lipídicas de benznidazol para el tratamiento de la enfermedad de Chagas

ARRUA, EVA CAROLINA; HARTWIG, OLGA; LOTETZ, BRIGITTA; BASTIAT, GUILLAUME; MURGIA, XABIER; LEHR, CLAUS MICHAEL; SALOMON, CLAUDIO JAVIER

Congreso; Reunión Internacional de Ciencias Farmacéuticas; 2018

El objetivo de este trabajo fue formular y caracterizar nanocápsulas lipídicas (NCL) de benznidazol (BNZ). Las NCLs de benznidazol se prepararon mediante un método de inversión de fase, partiendo de una solución de BNZ en acetona que se incorporó a la fase lipídica (Labrafac-WL® : 846; 1028 y 1209 mg). Luego se evaporó la acetona y el residuo se mezcló con Lipoid®S75-3 (75 mg), NaCl (156 mg) y Solutol: Kolliphor® HS15 (1934; 846 y 484 mg) y se sometió a 3 ciclos de aumento y descenso de temperatura (de 50-90 ºC) con agitación magnética. Durante la última etapa de descenso de temperatura se agregaron 5 ml de agua destilada a 4 °C. Empleando la misma metodología se formularon NCL fluorescentes reemplazando BNZ por el marcador fluorescente NileRed. Las NCL fueron caracterizadas en términos de: tamaño (nm), índice de polidispersidad (IP, en nm) y estabilidad en diferentes medios. Fueron analizadas por microscopía electrónica de transmisión y se estudió la interacción de estos sistemas con mucinas y con cultivos celulares de células Caco-2 (estudiando viabilidad, integridad y permeabilidad de BNZ). Las NCL se formularon con distintasproporciones de los componentes y se obtuvieron nanosistemas con diferentes tamaños: 28, 48 y 103 nm, cuyos IP fueron 0,049; 0,039 y 0,071 nm respectivamente. De acuerdo a los resultados obtenidos las NCL fueron estables en medios de fluidos gastrointestinales simulados y no interaccionaron con las proteínas del mucus, indicando que podrían atravesar fácilmente dicha barrera. En presencia de concentraciones elevadas de NCL se observaron altos porcentajes de viabilidad celular (valores mayores al 80%). La monocapa celular se mantuvo integra, comprobado por medidas de resistencia eléctrica transepitelial y microscopía electrónica de barrido. Además, las NCL lograron incrementar la permeabilidad aparente de BNZ más de 10 veces. Los ensayos de citometría de flujo y microscopía confocal indicaron que el 100 % de las NCL atravesó la monocapa de las células Caco-2. Se concluye que las NCL de BNZ representan una alternativa atractiva para el tratamiento del Chagas.