EL FACTOR DE NECROSIS TUMORAL ALFA (TNF-) INDUCE LA PROLIFERACIÓN DE UN ADENOCARCINOMA MAMARIO MURINO POR UN MECANISMO QUE REQUIERE DE LA PARTICIPACIÓN DE LOS RECEPTORES DE TNF- TIPO 1 y 2.

RIVAS MA; ROSEMBLIT C; CARNEVALE R; SALATINO M; PROIETTI CJ; BEGUELIN W; CHARREAU EH; SCHILLACI R; ELIZALDE PV

Mar del Plata

Congreso; Reunión de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica; 2005

Sociedad Argentina de Investigación Clínica

El TNF-a ejerce sus efectos biológicos a través de los receptores TNFR-1 y TNFR-2. En ciertos cánceres de mama, el TNF-a induce la progresión del ciclo celular, pero se desconoce el tipo de receptores y la señalización asociada. Previamente hemos mostrado que el TNF-a es mitogénico en las células C4HD provenientes de un tumor mamario murino progestágeno dependiente, y que las quinasas involucradas son la p42/p44 MAPK, JNK y PI-3K/Akt. El objetivo del presente trabajo fue caracterizar la presencia de receptores de TNF-a y establecer su participación en la proliferación y señalización intracelular en células C4HD. Aquí reportamos que el bloqueo de cada vía con su inhibidor específico (PD98059, SP600125 y LY294002 para p42/p44 MAPK, JNK y Akt respectivamente) conduce al arresto celular, sin aumento de apoptosis, según determinamos mediante tinción con ioduro de propidio y citometría de flujo. Mediante citometría de flujo y Western Blot, determinamos que las células C4HD  expresan TNFR-1 y TNFR-2. Utilizando anticuerpos bloqueantes dirigidos contra uno u otro receptor, observamos que se requiere que ambos sean funcionales para que se produzca la activación de las vías p42/p44 MAPK, JNK y PI-3K/Akt. Luego, utilizando anticuerpos estimulantes de los receptores se observó que cada uno por separado es capaz de activar estas quinasas. Además, en ensayos de proliferación por incorporación de timidina-[3H], se observó que el bloqueo de TNFR-1 disminuye la proliferación de las células C4HD inducida por TNF-a en un 58,2 ± 4,5%, mientras que el bloqueo de TNFR-2 lo hace en un 95,1 ± 41,2%. La estimulación de cada receptor por separado condujo a la proliferación de las células C4HD (89,7 ± 5,9% para el TNFR-1 y 113,1 ± 19,9% para el TNFR-2). En este trabajo hemos mostrado que ambos receptores de TNF-a están involucrados en la proliferación de células C4HD inducida por TNF-a y que ambos participan en la activación de las mencionadas vías de transducción de señales.