Participación de Stat3 en la activación del receptor de progesterona por progestágenos.

PROIETTI CJ; BEGUELIN W; ROSEMBLIT C; CARNEVALE R; RIVAS MA; CHARREAU EH; SCHILLACI R; ELIZALDE PV

Mar del Plata

Congreso; Reunión de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica; 2006

Sociedad Argentina de Investigación Clínica (saic)

En los últimos años, se han identificado un gran número de coactivadores que modulan la función de los receptores nucleares. Demostramos previamente que los progestágenos son capaces de inducir la activación transcripcional de Stat3 en células tumorales mamarias humanas y murinas mediante un mecanismo que requiere las actividades de las quinasas Jaks y c-Src. También encontramos que la presencia de Stat3 activa es un requisito para la estimulación del crecimiento de células de cáncer de mama por progestágenos, tanto in vivo como in vitro. El presente trabajo estudia la capacidad de Stat3 de modular la función del PR unido a su ligando, en las células C4HD progestágeno-dependientes, provenientes de un adenocarcinoma mamario murino inducido por MPA, y en las células T47D. Células C4HD y T47D fueron cotransfectadas de manera transiente con un vector de expresión para una forma mutante constitutivamente activa de Stat3, Stat3-C, junto con un vector reportero conteniendo cinco copias del elemento respondedor a progesterona (PRE) clonadas río arriba del gen de la luciferasa. La transfección con cantidades crecientes de Stat3-C estimuló, de manera dosis-dependiente, la transcripción del PRE por MPA. Mediante ensayos de inmunofluorescencia y microscopía confocal se demostró que Stat3 y PR se asocian en el núcleo luego del tratamiento de las células C4HD con MPA por 15 minutos. Se estudió el reclutamiento del PR y de Stat3 a la región promotora del gen bcl-X que contiene un PRE, mediante ensayos de inmunoprecipitación de la cromatina. El tratamiento de las células C4HD con MPA, indujo la asociación específica de Stat3 y PR al PRE en el promotor de bcl-X, en el contexto de células vivas. Estos resultados demuestran que el PR activado por su ligando interacciona con Stat3 aumentando la activación transcripcional del PR. De esta forma describimos, por primera vez a Stat3 como coactivador del PR.