CAVEOLINA-1 FAVORECE LA ACTIVIDAD TRANSCRIPCIONAL DEL RECEPTOR DE PROGESTERONA EN CéLULAS DE CáNCER DE MAMA

BEGUELIN W; SALATINO M; PROIETTI CJ; CARNEVALE R; RIVAS MA; ROSEMBLIT C; CHARREAU EH; SCHILLACI R; ELIZALDE PV

Mar del Plata

Congreso; Reunión de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica; 2006

Sociedad Argentina de Investigación Clínica (SAIC)

Previamente identificamos a caveolina-1 (cav-1) como un gen cuya expresión es regulada positivamente por el progestágeno sintético acetato de medroxiprogesterona (MPA) mediante un mecanismo que involucra al receptor de progesterona (PR) clásico. Estos hallazgos fueron realizados en el tumor mamario murino C4HD, de origen ductal, progestágeno-dependiente, requiere MPA para su crecimiento y expresa altos niveles de PR. Demostramos que al suprimir la expresión de cav-1 disminuye la proliferación de células epiteliales C4HD inducida por MPA. A partir de estos antecedentes, evaluamos si el bloqueo de la expresión de cav-1, utilizando oligodeoxinucleótidos antisentido (ODNAS), interfiere con la actividad transcripcional del PR. Para ello se realizaron transfecciones transientes con una construcción PRE-luciferasa en células C4HD y en las líneas de tumor mamario T47D y LM3, esta última cotransfectada con PR. La actividad transcripcional del PR inducida por MPA se redujo significativamente al bloquear la expresión de cav-1 con ODNAS en las células C4HD y LM3. La sobreexpresión de cav-1 en células T47D incrementó fuertemente la actividad transcripcional del PR. Por otro lado, ensayos de coinmunoprecipitación y microscopía confocal mostraron que el tratamiento de células C4HD con MPA por 5 y 10 minutos induce la asociación de cav-1 con PR. Por último, en el 16% de los carcinomas mamarios humanos se ha identificado una mutación puntual en el codón 132 del gen de cav-1. Por lo tanto, evaluamos la posibilidad de que cav-1 esté mutada en la prolina 132 en el tumor C4HD, contribuyendo así a su rol transformante. Mediante un screening mutacional con PCR-RFLP y análisis de secuencia, comprobamos que el gen de cav-1 del tumor C4HD no está mutado en el codón 132. Nuestros resultados muestran que cav-1 favorece la activación transcripcional del PR y que el efecto de cav-1 sobre la proliferación de células C4HD no puede ser atribuido a la mutación del codón 132.