MAPK Activated by Heregulin (HRG) and by the Synthetic Progestin Medroxyprogesterone Acetate (MPA) Are Able to Phosphorylate STAT3 on SER-727 in Breast Cancer Cells

ROSEMBLIT C; PROIETTI CJ; SALATINO M; CARNEVALE R; RIVAS MA; BEGUELIN W; CHARREAU EH; SCHILLACI R; ELIZALDE PV

Buenos Aires

Jornada; XXII Jornadas Nacionales de Oncología del Instituto ?Ángel H. Roffo?; 2006

Instituo Angel H. Roffo

Previamente demostramos que HRG, ligando de los receptores con actividad de tirosina quinasa tipo I (RTKs-I), activa p42/p44 MAPK en células C4HD progestágeno-dependiente, provenientes de un adenocarcinoma mamario murino inducido por MPA. Además, se sabe que HRG activa MAPK en la línea celular de cáncer de mama humano T47D. En el presente trabajo estudiamos la fosforilación de la proteína transductora de señales y activadora de transcripción 3 (Stat3) en serina727 por MAPK activadas por HRG y MPA en cáncer de mama. Tanto en células C4HD como en T47D, el tratamiento con HRG (20 ng/ml) y MPA (10 nM) por 5 a 10 minutos produjo fosforilación de Stat3 en serina727, medida por western blot utilizando un anticuerpo contra la forma fosforilada de Stat3. Al preincubar las células con el inhibidor de MAPK U0126 (10 m M), se inhibió la fosforilación así como la activación transcripcional de Stat3. Demostramos además que MAPK activadas por HRG o MPA son capaces de fosforilar in vitro a Stat3 usando ensayos con ATP no radioactivo y MAPK inmunoprecipitadas de células C4HD y T47D tratadas con HRG y MPA. Es sabido que la fosforilación de Stat3 en serina727 es esencial para su activación transcripcional. Sin embargo, no se conocen los mecanismos ni las quinasas involucradas. Nuestros resultados demuestran por primera vez que MAPK acivadas por un ligando de RTKs-I y por progestágenos son capaces de fosforilar in vivo e in vitro a Stat3.