Inhibición del crecimiento de un carcinoma mamario murino por inmunización con células tumorales con STAT3 bloqueada

TKACH M; ROSEMBLIT C; RIVAS MA; BEGUELIN W; PROIETTI CJ; SUNDBLAD V; DIAZ FALQUE MC; CHARREAU EH; ELIZALDE PV; SCHILLACI R

La Falda, Cordoba

Congreso; LVI Reunión Científica de la Sociedad Argentina de Inmunología; 2008

Sociedad Argentina de Inmunología

Numerosas evidencias indican que Stat3 juega un rol central en el desarrollo del cáncer de mama. En particular, hemos demostrado que la proliferación mediada por acetato de medroxiprogesterona de las células de cáncer de mama murino C4HD, depende de la activación de Stat3 tanto in vitro como in vivo. El objetivo de este trabajo fue evaluar si la inoculación de células tumorales que tienen bloqueada la activación de Stat3 puede proteger al posterior desafío con el tumor parental. Para ello, se inyectaron s.c. ratones hembra Balb/c 6, 4 y 2 semanas antes del desafío tumoral con 2x106 células C4HD transfectadas in vitro con el vector de expresión del dominante negativo de Stat3 (DNStat3), Stat3Y705-F, e inactivadas por irradiación. Como control se inyectaron animales con PBS o con células C4HD wt o transfectadas con un vector vacío (pcDNA 3.1). Se monitoreó el crecimiento tumoral y se observó una inhibición sólo en los ratones inmunizados con las células transfectadas con el DNStat3. A los 21 días post-desafío la inhibición del grupo DNStat3 fue de 77,3+5,4%, 74,3+6,1%,  78,2+5,2% con respecto a los grupos PBS, C4HD wt y vector vacío, respectivamente. Al repetir el protocolo de inmunización en ratones nude, se comprobó que no protegió contra el desarrollo del tumor, demostrando la participación de los linfocitos T en el efecto antitumoral. Mediante ensayos de hipersensibilidad retardada en ratones Balb/c inmunizados se observó una marcada reactividad en los animales del grupo DNStat3, mientras que los grupos controles no mostraron inflamación a las 48h. Al enfrentar esplenocitos obtenidos del grupo DNStat3 con células C4HD se observó una citotoxicidad específica de un 37,9+0,57%, determinada por liberación de 51Cr (p<0,05 vs. vector vacío, p<0,001 vs PBS y C4HD wt). Con el objeto de estudiar un posible mecanismo por el cual la inhibición de Stat3 induce un fenotipo inmunogénico, se analizó la expresión de las moléculas coestimuladoras CD80 y CD86. El tratamiento de las células C4HD con JSI, inhibidor de la vía de Stat3, indujo la expresión de CD86 determinada por citometría de flujo. En conclusión, nuestros resultados sugieren que la inmunización con células de cáncer de mama con Stat3 bloqueado, gatilla una respuesta inmune celular que inhibe el crecimiento del tumor parental.