Vías de transducción de señales inducidas por el factor de necrosis tumoral alfa (TNF) en células T47D

RIVAS MA ; ROSEMBLIT C ; CARNEVALE R ; PROIETTI CJ ; SALATINO M ; CHARREAU EH ; ELIZALDE PV ; SCHILLACI R

Mar del Plata

Congreso; Reunión de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica; 2004

Sociedad Argentina de Investigación Clínica

En ciertos tumores de mama el TNFa promueve la progresión del  ciclo celular. Previamente demostramos que el TNFa favorece la proliferación de células C4HD, provenientes de un carcinoma mamario murino progestágeno-dependiente, a través de la activación de las vías de señalización ERK1/2 y  PI3K/Akt, pero independientemente de la vía de p38. El objetivo del presente trabajo fue estudiar las vías de señalización activadas por TNFa pero, en este caso, en la línea de carcinoma mamario humano T47D y su relación con la proliferación celular. Para determinar el nivel de activación de cada vía realizamos ensayos de Western blot, utilizando anticuerpos específicos contra la forma fosforilada de cada quinasa  involucrada, en extractos de células T47D estimuladas entre  0-60 min con TNFa 20 ng/ml. Se observó una fuerte activación de la vía de ERK1/2 (11.4 ± 4.5 veces) y una moderada activación de la vía PI3K/Akt (3.5 ± 1.1 veces) a los 15 min de estimulación con TNFa siendo este efecto transiente. En cambio, no se observó activación de vía de la p38. Al analizar la proliferación celular, determinada a las 24 h por incorporación de timidina-3H, observamos que el TNFa indujo un incremento de 40  ± 5% (P<0.001) con respecto a los controles. Dicha proliferación fue inhibida significativamente por el pretratamiento con PD98059 (20 uM), inhibidor de ERK1/2, y por LY294002 (4uM), inhibidor de PI3K. Nuestros resultados sugieren que el TNF induce la proliferación de carcinomas mamarios, tanto murino como humano, a través de un patrón común de vías de señalización que involucra la activación de las vías de Erk1/2 y PI3K/Akt pero no de vía de p38.