ESTUDIO DEL ACTIVADOR DE RHOA, GEF-H1, COMO POSIBLE BIOMARCADOR EN CÁNCER DE TIROIDES

BERMUDEZ VICENTE; LUCÍA FERNANDEZ CHAVEZ; EXEQUIEL ALONSO; KAREN SCHWEITZER; JESSICA CARBALLIDO; ROSEMBLIT C; MATEO N CAMPOS HAEDO; MARILINA MASCARO; SERGIO RECIO; FERRONATO MARIA JULIA; FERMENTO MARIA EUGENIA; ALONSO ELIANA NOELIA; MARIA MARTA FACCHINETTI; ALEJANDRO CARLOS CURINO; GEORGINA PAMELA COLO

Buenos Aires

Jornada; Jornadas Multidisciplinarias de Oncología del Instituto de Oncología ?Ángel H. Roffo?; 2022

Instituto de Oncología ?Ángel H. Roffo?

Introducción: GEF-H1 es uno de los principales activadores de la GTPasa RhoA, cuyasobreexpresión se ha demostrado asociada al desarrollo de distintos tipos de cáncer. Encáncer de mama hemos observado que GEF-H1 se encuentra implicado en los procesos deremodelación del citoesqueleto, migración y proliferación celular, así como en el desarrollotumoral. No obstante, aún no se ha estudiado su rol en la progresión del cáncer de tiroides(CT), la neoplasia endocrina más prevalente y con una incidencia en aumento.Objetivo: Estudiar la expresión de GEF-H1 tanto in silico como in vitro en biopsias detiroides humanas. Estudiar los efectos en los procesos involucrados en el desarrollo tumoralal inhibir la expresión de GEF-H1 en una línea celular de CT.Materiales y Métodos: Se emplearon biopsias humanas y líneas celulares de CT. Seutilizaron herramientas bioinformáticas y los datos transcriptómicos se analizaron conlenguaje R (Gene Expression Omnibus). Utilizamos el sistema CRISPR/Cas9 para generarclones knock-out (KO) para GEF-H1 en la línea de carcinoma papilar de tiroides (TPC-1)con dos guías de RNA distintas y el control se transfectó con el vector pX459 (sin guía).Estudiamos mediante inmunohistoquímica (IHQ), western blot (WB), ensayos deproliferación, migración e invasión el efecto de anular GEF-H1 en CT.Resultados: Mediante análisis bioinformático observamos que GEF-H1 se encuentra sobreexpresado a nivel de ARNm y de proteína en tejido tumoral (TT) comparado con el tejidonormal (TN). Determinamos que la expresión de GEF-H1 era significativamente mayor encarcinomas tiroideos papilares y anaplásicos que en TN (p