Método de screening para la identificación y estimación de antibióticos en músculo de pez de consumo humano

CARRIZO, J. C.; VALDES, M. E.; GRIBOFF, J.; WUNDERLIN, D. A.; AMÉ, M. V.

Congreso; VII Congreso Argentino de la Sociedad de Toxicología y Química Ambiental SETAC, Capítulo Argentino; 2018

En Argentina el consumo de antimicrobianos en humanos y en producción animal es alto, y tiene incidencia en el ambiente y en la resistencia bacteriana, problemática actual de gran relevancia. Por lo tanto, resulta de gran importancia identificar y cuantificar estos compuestos en diferentes matrices ambientales.El objetivo de este estudio fue desarrollar un método de screening de alta especificidad y sensibilidad que permita identificar y estimar la concentración de antibióticos de diversas familias (tetraciclinas, penicilinas, nitrofuranos, quinolonas, fluoroquinolonas, macrólidos y sulfamidas) en músculo de peces. Para ello se utilizó tejido liofilizado al cual se le adicionaron 47 estándares de antibióticos. Se evaluaron dos métodos de extracción de fase sólida (SPE) utilizando como solventes de extracción H2O:ACN (1:1)v/v para el método A y MeOH para el B . A su vez se ensayaron dos cartuchos de SPE, Oasis HLB y Strata X. La identificación y medición se realizó por infusión directa en un espectrómetro de masas de alta resolución (cuádruplo de tiempo de vuelo, QTOF) con ionización positiva y negativa. El 85% de los compuestos inyectados individualmente se detectaron mejor en modo positivo, mientras que el 15% se detectó mejor en modo negativo. Al inyectar un mix con los 47 antibióticos, 2 no se pudieron detectar.En modo positivo, con el método A se obtuvieron recuperaciones del 1 al 40%, mientras que para el B del 1 al 50%. Los métodos son complementarios debido a cada compuesto tiene una recuperación independientemente de la familia de antibióticos a la que pertenece. Los dos cartuchos de SPE mostraron resultados similares. En modo negativo se observa una disminución en el efecto matriz mejorando la detección de los compuestos. El método B permite detectar mejor el 86% de los compuestos obteniendo recuperaciones que van del 10 al 45%, mientras que para el método A van del 1 al 55%.De esta forma, en modo positivo en conjunto con los métodos de SPE se podrían detectar oxitetracilina (A y B), eritromicina (A y B), sulfadimethoxina (A y B) y trimetroprima (A); mientras que en modo negativo, usando el método B se podría detectar florfenicol; todos ellos en concentraciones similares o menores a la máxima concentración residual admitida por legislación internacional.La diversidad de compuestos requiere del uso complementario de los dos métodos de extracción. Las bajas recuperaciones obtenidas indican la necesidad del uso de estándares marcados isotópicamente y un método de detección más sensible (ej. Orbitrap).