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INVESTIGADORES

BATTAGLIA Marina Esther

congresos y reuniones científicas

Título:

Únicas En Su Clase: Toxicidad De Proteinas Cry De La Cepa {Bacillus Wiedmannii} Biovar {Thuringiensis} (Fcc41) Contra Mosquitos

Autor/es:

GIL MARIA FLORENCIA; LOPEZ ROCIO P; BATTAGLIA MARINA; BERON CORINA

Lugar:

CABA

Reunión:

Congreso; Congreso Argentino de Microbiología General; 2019

Institución organizadora:

Asociacion Civil Argentina de Microbiologia

Resumen:

Los agentes patógenos transmitidos pormosquitos hematófagos producen diversas enfermedades tales como malaria, fiebreamarilla, dengue, chikungunya, Zika, diversas encefalitis y filariasis, queconstituyen grandes problemas en salud pública. Entre los principales mosquitosvectores de tales agentes se encuentran representantes de los géneros {Anopheles}spp., {Culex} spp. y {Aedes} spp. Algunas bacterias entomopatógenas del género{Bacillus} son ampliamente estudiadas por sus propiedades como agentes microbianospara el control de estos vectores. Estas bacterias producen inclusiones parasporalescompuestas principalmente por proteínas Cry que tienen actividad insecticida cuandoson ingeridas por un insecto susceptible. Este cristal es solubilizado debidoal pH alcalino del intestino del insecto y clivado por proteasas intestinales. Estastoxinas así activadas se unen a receptores específicos de la membranaintestinal del intestino medio, se insertan en ella formando poros provocandola disrupción de la membrana, el desbalance iónico y la lisis de las célulasepiteliales, dando como resultado septicemia y muerte del insecto. En estecontexto, el estudio de las toxinas Cry resulta interesante como una posiblealternativa para el desarrollo de insecticidas biológicos. En trabajos previosllevados a cabo por ese grupo, se caracterizó una cepa nativa identificada como{Bacillus wiedmannii} biovar {thuringiensis} (FCC41) que exhibe mayor actividadinsecticida contra algunas especies de mosquito en comparación a la cepa dereferencia {B. thuringiensis} subsp. {israelensis}, utilizada enformulados para el biocontrol de estos dípteros. El genoma de esta cepa bacterianafue secuenciado, detectando genes codificantes de 6 proteínas Cry diferentes quefueron identificadas como Cry4-like1,Cry4-like 2, Cry52-like1, Cry52-like2, Cry24Ca y Cry41-like. El objetivo de este trabajo fue analizarla actividad insecticida de cada una de estas toxinas nativas contra larvas de {Culexquinquefasciatus}. Para ello, cadaproteína se clonó individualmente en un sistema de expresión específico para {B. thuringiensis} basado en el vectorde expresión pSTAB, el cual está optimizado para la producción de toxinas Crydebido a que contiene un promotor fuerte dependiente de la esporulación encombinación con una secuencia estabilizadora del mRNA. Los plásmidos resultantesfueron introducidos en la cepa acristalífera 4Q7, derivada de {B. thuringiensis} sp. {israelensis} carente de plásmidos codificantes desecuencias de genes {cry} y por lo tantocarente de actividad mosquitocida. La actividad tóxica de cada mutante seanalizó mediante bioensayos de 48 horas contra larvas de segundo estadio de {Cx.quinquefasciatus}. Todas las mutantes, a excepción de la portadora de laproteína Cry41-like, exhibieron actividad insecticida siendo la proteína Cry24Cala de mayor actividad mosquitocida a las 24 horas después de la aplicación deuna suspensión de complejo espora-cristal. Las proteínas Cry24Ca, Cry4-Like1,Cry4-Like2, Cry52-Like1, Cry52-Like2 de la cepa {Bacillus wiedmannii} biovar{thuringiensis} (FCC41) resultan de interés por su toxicidad contra larvas de{Cx. quinquefasciatus} y podrán ser utilizadas en el desarrollo debioinsecticidas específicos para el control de mosquitos de interés sanitario.

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