Evaluación de la penetración tópica de una droga oncológica nano-formulada por espectroscopía Raman

GISELA E. GÓMEZ; M. NATALIA CALIENNI; M. CECILIA IZQUIERDO; SILVIA DEL VALLE ALONSO; FERNANDO CARLOS ALVIRA; JORGE MONTANARI

Jornada; II Jornadas de Jóvenes Bionanocientíficxs (JoBioN); 2020

Antecedentes: El Vismodegib (Vis) es una droga antineoplásica de última generación empleada para el tratamiento de Carcinoma Basocelular que presenta efectos colaterales tras su administración oral. Para controlar su disponibilidad en la epidermis viable (EV)-donde ejerce su efecto-nuestro grupo de pertenencia obtuvo una formulación de liposomas ultradeformables (LUD-Vis) con la capacidad de transportarlo a través del Estrato Córneo (EC), la barrera impermeable cutánea. Se busca detectar dicha formulación por Espectroscopia Raman en el EC de piel humana y porcina para contraponerlo con resultados con HPLC y Espectroscopia UV-Visible. Métodos: Explantos cutáneos (diámetro: 24 mm) provenientes de descartes quirúrgicos de abdominoplastias y de orejas de cerdo incubados 1h a 37°C con 50 μl de LUD-Vis en un dispositivo de Saarbrücken. Luego fueron sometidos al descamado sucesivo del EC con cinta adhesiva (Tape Stripping). Capas correspondientes al EC superior, medio e inferior fueron estudiadas con un microscopio confocal Raman Horiba Yovin Ivon equipado con un láser que emite a 785 nm a una potencia máxima de 150 mW, que emplea como detector un espectrómetro con una red de 600 líneas/mm y un detector CCD enfriado a ? 60°C. Estos valores se compararon con los obtenidos por HPLC tras extracción con DMSO y con Acetonitrilo (AcN) en piel humana y porcina, respectivamente. Se realizaron ensayos para validar el modelo ex vivo de piel porcina, usando 50 μl de suspensión liposomal fluorescente, con Rodamina en su interior y resuspendida en Calceína, incubación 1h a 37°C. Se hizo Tape Stripping y las capas de EC superior, medio e inferior se estudiaron con Cytation C5 y los perfiles se compararon con los obtenidos para el modelo de piel humana. Resultados: Los espectros Raman adquiridos permitieron identificar los modos vibracionales activos del Vis puesto que no se registra esta información en literatura especializada. Por otro lado, la señal Raman de Vis se registró con mayor intensidad en las primeras capas del EC, tanto en los explantos de piel humana como porcina. Además, los perfiles de penetración cutánea en los modelos ex vivo de piel humana y porcina presentaron similitudes frente a la suspensión liposomal fluorescente, lo cual permite validar el modelo. Conclusiones: Se obtuvieron señales Raman de Vis y LUD-Vis, que mostraron coincidencias con análisis por HPLC y extracción con AcN para la piel humana y porcina, respectivamente, en cuanto a distribución del activo en epidermis. Estos ensayos permitieron validar una correlación entre ambas técnicas permitiendo una detección más rápida y sensible que la cromatográfica. El modelo de piel porcina pudo ser validado debido a la similitud mostrada con el modelo de piel humana.