Patogenicidad de un mutante natural de la apolipoproteína A-I humana asociado a amiloidosis: inestabilidad y respuesta pro-inflamatoria

ROSU, S. A; NAHUEL A. RAMELLA; EDUARDO D. PRIETO; M. ALEJANDRA TRICERRI

Salto

Congreso; Latin American Crosstalk in Biophysics and Physiology. SBF.uy-SAB; 2015

Buenos Aires : SAB - Sociedad Argentina de Biofísica ; Montevideo : Seccional Biofísica de la Sociedad Uruguaya de Biociencias.

INTRODUCCIÓN:Varios mutantes naturales de apolipoproteína A-I humana son asociados conamiloidosis hereditaria. Si bien los mecanismos moleculares subyacentes deesta patología permanecen inciertos, se plantean dos posibilidades: Cambiosconformacionales de la proteína que desencadenan un plegamiento anómalode la misma, o la existencia de un ambiente inflamatorio crónico quefavorezca el mal plegado ó pérdida de función. Ambas situacionesconducirían a la formación de agregados y depósito en distintos órganos,afectando su función con variable severidad.OBJETIVOS:? Examinar los efectos de Arg173Pro (un mutante puntual de Apo A-I)sobre estructura, estabilidad y tendencia a la agregación, como así también,su habilidad para unir ligandos putativos.? Estudiar una posible activación de cascadas proinflamatorias, agregamosvariantes naturales sobre células THP, una línea celular de monocitoshumanos, y posteriormente medimos la liberación de TNF-α e IL- 1 β.RESULTADOSNuestros resultados indican que la mutación induce una drástica pérdida deestabilidad a pH fisiológico que podría determinar la alta tendencia aagregarse observada como complejos pro-amiloidogénicos. La incubaciónbajo condiciones acídicas no parece inducir desestabilización significante,tampoco contribuye con la unión del mutante a SDS. Mientras que la unióna este detergente es mayor a pH neutro para el mutante comparado con w-t,la interacción de la variante Arg173Pro con heparina depende del pH,siendo más bajo pH 5 y más alto que W-T bajo condiciones fisiológicas.Arg173Pro indujo una mayor liberación de TNF-α e IL- 1 β por parte de lascélulas THP, lo cual podría ser clave para perpetuar un microambienteproinflamatorio que incremente el daño local del órgano afectado.Los autores agradecen el apoyo de UNLP (M158), y CONICET (PIP PIP 112 201101-00648)