EXPRESIÓN, LOCALIZACIÓN Y PERFIL ANTIGÉNICO DE PROTEÍNAS TOLT DE Trypanosoma cruzi

MAITE M LOBO; VIRGINIA BALOUZ; LUCIANO MELLI; GASPAR CANEPA; SANTIAGO CARMONA; ANDRES CIOCCHINI; FERNAN AGUERO; CARLOS A. BUSCAGLIA

Santa Fe

Simposio; XXVIII Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Protozoología y Enfermedades Parasitarias SIMPOSIO Internacional de Biología Celular y Molecular de la Enfermedad de Chagas; 2016

XXVIII Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Protozoología

TolT fue caracterizado originalmente como unantígeno flagelar de tripomastigotes de T. cruzi,codificado por un reducido número de genesaltamente homólogos dispuestos en tándem.Posteriormente, se determinó que era blanco deuna fuerte respuesta inmune celular y humoral enanimales y/o pacientes chagásicos, por lo que seevaluó su potencial como candidato vacunal yreactivo para serodiagnóstico. Una recientebúsqueda en bases de datos reveló una mayorcomplejidad genómica para los genes TolT entripanosomátidos. Sólo en T. cruzi pudimosidentificar 19 secuencias con similitud significativaa TolT (>40% identidad) las cuales se dividieron,en base a criterios estructurales y de secuencia,en 3 grupos principales llamados TolT-A, TolT-B yTolT-C, siendo TolT-A el grupo que contiene alantígeno TolT original. En líneas generales, todoslos miembros de la familia poseen un péptidoseñal clivable en el extremo N-terminal seguidopor una región madura más conservada conalgunos motivos y residuos Cisteína conservadosy una señal de anclaje por GPI en su extremo Cterminal,aunque hay algunas excepciones a estadisposición estructural. Topológicamente, elextremo más divergente entre los grupos TolT-A yTolT-B se ubicaría hacia la parte distal,coincidente con lo observado en otras familiasmultigénicas del parásito involucradas enfenómenos de interacción y/o evasión inmune.Para caracterizar en más detalle esta familiamultigénica realizamos estudios a nivel deexpresión (RT-PCR y técnicas inmunoquímicas) ylocalización subcelular (microscopía y distintosensayos bioquímicos) de miembrosrepresentativos de los distintos grupos de TolT enlos 3 estadíos principales de este parásito. Porotro lado, realizamos un mapeo epitópicopreliminar en pacientes infectados crónicosusando microarreglos de péptidos y variantesdelecionales de las distintas proteínasexpresadas de manera recombinante. Nuestrosresultados indican que TolT-A y TolT-B presentanuna región común e inmunodominante cercana alextremo C-terminal y, que aparentemente son coexpresadasen la superficie del flagelo deltripomastigote (como también en los estadios deamastigotes en transición) y secretadas al medioextracelular. TolT-C, grupo más divergente ymenos representado, presenta una menorantigenicidad y un distinto patrón de expresión.En definitiva, nuestros resultados constituyen unacaracterización preliminar a nivel genómico,estructural y de expresión de las proteínas TolTde T. cruzi,