Evaluación de alfaGal sintético como marcador de eficacia terapéutica en Chagas pediátrico

ABAL, MANUEL; BALOUZ, VIRGINIA; CRUZ, CINTIA V; GIORGI, M. EUGENIA; MARINO, CARLA; ALTCHEH, JAIME; BUSCAGLIA, C.A.

CABA

Simposio; XXI Simposio Internacional Mundo Sano; 2023

Mundo Sano

El criterio de eficacia terapéutica en pacientes con enfermedad de Chagas se basa en la conversión negativa de los test seroló gicos convencionales (tELISA). Sin embargo, y debido a que es tos tests utilizan antígenos complejos (parásitos enteros o lisa dos totales obtenidos a partir de ellos), la seronegativización de los pacientes puede demorar años, aun en casos de tratamien to exitoso. La fracción antigénica F2/3 de tripomastigotes de T. cruzi, cuyo epitope mayoritario es el glicano αGal (Galp(α1-3)Gal p(β1-4)GlcNAc), es considerada uno de los gold standard para el serodiagnóstico de enfermedad de Chagas y un potencial bio marcador post-terapéutico. Sin embargo, la obtención de este reactivo presenta grandes desafíos (manipulación de formas infectivas de T. cruzi, complejos protocolos de purificación, etc), lo que dificulta su implementación en la clínica. Recientemente, nuestro grupo desarrolló un trisacárido sintético (Galp(α1-3) Galp (β1-4)Glc), que fue luego validado como un análogo antigénico de αGal (1) . En este trabajo, exploramos el uso una neoglicoproteí na generada por conjugación de este trisacárido a BSA, llamada NGP-Tri, como biomarcador de eficacia terapéutica en Chagas pediátrico. La síntesis química del trisacárido Galp(α1-3)Galp(β1-4) Glc, la generación de NGP-Tri por condensación a BSA y la ca racterización estructural de esta molécula han sido descritas (1) . A partir de NGP-Tri se desarrolló un ensayo ELISA (ELISA-αGal) con el que se hizo un análisis retrospectivo de 509 muestras obtenidas de una cohorte de 82 niños infectados con T. cruzi, que fueron diagnosticados y tratados con drogas tripanocidas en el Servicio de Parasitología y Chagas del Hospital de Niños “Ricardo Gutiérrez”. Esta cohorte fue estratificada de acuerdo a la edad de los pacientes al inicio del tratamiento: Grupo 1, niños menores a 5 meses; Grupo 2, niños de entre 7 meses y 3 años y Grupo 3, niños de entre 3 y 16 años. La seroprevalencia global de NGP-Tri fue de 58.5%, detectándose niveles particularmente bajos de reactividad en pacientes del Grupo 1 (47.6%) respec to de los otros grupos (Grupo 2, 68.4%, Grupo 3, 75.0%) . Para evaluar la cinética de decaimiento de anticuerpos, se analiza ron 490 muestras provenientes de 62 pacientes positivos para ELISA-αGal. Para el Grupo 1 (n=19), ELISA-αGal acortó significativa mente el tiempo de seronegativización con respecto a tELISA (mediana [IC95%] de 2.1 [0.7-12.3] meses y 5.4 [4.9-8] meses, res pectivamente). La misma tendencia se vio en niños del Grupo 2 (n=19), donde la mediana de negativización fue de 7 [1.5-19] me ses para ELISA-αGal y 46 [19-83] meses para tELISA. Por último, en pacientes del Grupo 3 (n=24), la mediana de negativización con ELISA-αGal fue de 53 [26-84] meses. Ningún paciente del Grupo 3 logró negativizar para tELISA. El uso de NGP-Tri per mite acortar los tiempos de seguimiento, lo que podría redun dar en una menor ‘pérdida’ de pacientes debido a la deserción prematura del protocolo. NGP-Tri también podría contribuir a la identificación y validación clínica de nuevas drogas o blancos terapéuticos, una necesidad urgente en el área. Referencia: (1) R. Lopez et al., Carbohydr. Res., vol. 478, pp. 58-67, 2019.