Caracterización exhaustiva del perfil serológico de TSSA de T. cruzi: una molécula, distintos epítopes y múltiples formas de reconocimiento en personas con enfermedad de Chagas

ROMER, GUADALUPE; BRACCO, LEONEL A.; RICCI, ALEJANDRO D.; BALOUZ, VIRGINIA; BUSCAGLIA, CARLOS A.; AGUERO, FERNAN

CABA

Simposio; XXI Simposio Internacional Mundo Sano; 2023

Mundo Sano

T. cruzi, el agente etiológico de la enfermedad de Chagas se clasifica en 6-7 linajes evolutivos, los cuales presentan una distribución eco epidemiológica muy diversa. Ensayos previos demostraron que distintas isoformas de la proteína TSSA (restringida a la superficie de tripomastigotes), presentan diferente inmunogenicidad y reconocimiento serológico en infecciones con T. cruzi, lo cual posiciona a esta molécula como un candidato para estrategias de serotipificación de este patógeno. En este trabajo caracterizamos exhaustivamente el perfil serológico de TSSA en pacientes con Chagas de distintas regiones geográficas usando una combinación de ensayos basados en microarreglos peptídicos. Para evaluar la seroprevalencia de TSSA utilizamos microarreglos de péptidos de 16 aa (n=311) basados en la secuencia completa de las 4 isoformas principales: TSSAI, II, III y IV. Para el mapeo epitópico de TSSAII, la isoforma con mayor relevancia en infecciones humanas, usamos sets de péptidos de diferente largo (entre 8 y 13 aa, n = 209) sobre la secuencia de su región central (TSSAII24-62). Para evaluar el impacto antigénico de las variaciones entre las TSSAs utilizamos péptidos quiméricos de 15 aa (n = 1536), conteniendo la combinación de todas las variaciones posibles encontradas en genomas de T. cruzi. Las posiciones no variables fueron analizadas mediante una estrategia de alanine scanning. Los distintos sets de péptidos se evaluaron con 71 sueros positivos provenientes de 6 regiones de América (Argentina, Bolivia, Brasil, Colombia, México y Estados Unidos). El procesamiento y análisis de los datos obtenidos lo realizamos con RStudio. Los resultados obtenidos revelan variaciones en la seroprevalencia de las cuatro isoformas principales de TSSA entre pacientes de las diferentes regiones, correlacionando con la distribución diferencial de los linajes evolutivos de T. cruzi en el continente. También identificamos los residuos clave para el reconocimiento antigénico, y la presencia de al menos tres epítopes B lineales en TSSAII, la isoforma con mayor seroprevalencia en humanos. A través de rastreos genómicos identificamos 9 nuevas TSSAs en T. cruzi, y el impacto de esta diversidad en su reconocimiento humoral analizado por microarreglos. Estos rastreos revelaron una TSSA atípica en T. cruzi marinkellei (TSSA-MARK) una subespecie presente en murciélagos, la cual fue reconocida específicamente por el suero de un paciente proveniente de Colombia. En conjunto, los resultados obtenidos aportan nueva información sobre la evolución de TSSA, su conformación epitópica, y los modos de reconocimiento por parte de pacientes con enfermedad de Chagas. Estos descubrimientos tienen implicaciones prácticas para el diseño y/o evaluación de estrategias de serotipificación en T. cruzi.