INVESTIGADORES
ANGELI Emmanuel
congresos y reuniones científicas
Título:
Tuberculosis bovina: análisis de lesiones macro y microscópicas y su relación con la cantidad de bacilos en los granulomas
Autor/es:
BELOTTI, EM; ANGELI, E; SCHILD, CO
Lugar:
Santa Fe
Reunión:
Encuentro; XIV Encuentro de Jóvenes Investigadores de la UNL. V Encuentro de Jóvenes Investigadores de Universidades de Santa Fe.; 2010
Institución organizadora:
Universidad Nacional del Litoral. Universidad Católica de Santa Fe. Universidad Tecnológica Nacional. Federación universitaria del litoral
Resumen:
Tuberculosis bovina: análisis de lesiones macro y microscópicas y su relación con la cantidad de bacilos en los granulomas. Introducción. La Tuberculosis bovina (TBC) es una enfermedad infecciosa para los animales y una importante zoonosis, causada por Mycobacterium bovis, integrante del Complejo Mycobacterium tuberculosis. En nuestro país la prevalencia en faena es del 1%, y las principales acciones destinadas a su control se basan en la identificación de animales reactores a campo con posterior envío de los mismos a faena y un sistema de vigilancia en frigorífico. Diversos estudios informan acerca de una gran variedad de presentaciones anatomo-patológicas en los animales afectados, observándose un amplio rango de lesiones, desde pequeñas y bien localizadas hasta generalizaciones masivas. Existen en el ámbito científico ciertas dudas acerca de si este hecho se debería a diferencias en la virulencia de cada genotipo, o bien en la respuesta individual de cada animal, sobre todo teniendo en cuenta que las lesiones de esta enfermedad se producen por una reacción de hipersensibilidad del individuo. Objetivos. Caracterizar macro y microscópicamente las lesiones compatibles con TBC bovina halladas en diferentes órganos durante el proceso de faena, e intentar establecer una relación ente la magnitud de éstas y el nº de bacilos observados con técnicas histopatológicas apropiadas. Metodología. Se tomaron 91 muestras de órganos de 62 bovinos que presentaban lesiones macroscópicas compatibles con TBC durante la faena. Las mismas se fijaron en formol bufferado al 10% y se procesaron siguiendo técnicas histológicas de rutina para su inclusión en parafina. Se realizaron cortes con micrótomo para su posterior coloración con Hematoxilina-Eosina y Kinyoun; esta última, para la observación de bacilos ácido-alcohol resistentes. La caracterización de las lesiones macro y microscópicas se efectuó en base al método de score propuesto por Wangoo y col. (2005). La búsqueda de bacilos del Complejo Mycobacterium tuberculosis se realizó en microscopio óptico a 400 aumentos. Todos los datos se recolectaron en planillas ad-hoc para su posterior análisis. Por otra parte, se enviaron muestras de 40 de los individuos estudiados seleccionados al azar, a otro laboratorio que participa en este proyecto donde se realizó el cultivo y aislamiento de micobacterias, en medios de Lowenstein-Jensen y de Stonebrick, previa homogeneización y decontaminación por el método de Petroff. Resultados alcanzados. De las 96 muestras, 91 presentaron lesiones compatibles con TBC y 5 fueron utilizadas como controles negativos; las lesiones se encontraron en ganglios mediastínicos (43), retrofaríngeos (22), bronquiales (5) y mesentéricos (2), pulmón (13), hígado (2), peritoneo (1), pleura (2) y otros (1). A la observación microscópica, el 58% de ellas presentó un score microscópico de 4, mientras el 40% un score microscópico de 3; sólo tres muestras pudieron enmarcarse en los scores 1 y 2. De las muestras clasificadas en el score 4, en un 28% de ellas se observaron más de cinco bacilos en distintos campos; en un 35% entre uno y cinco; y en un 37% se pudo encontrar uno o ningún bacilo en los campos microscópicos observados. De la misma manera, en los clasificados en el score 3 se encontraron más de cinco bacilos en el 24%; entre uno y cinco en el 50% y uno o ninguno en el 26%. De las tres muestras clasificadas en los scores 1 y 2, en una de ellas se observaron entre 1-5 bacilos y en el resto uno o ninguno. Se realizó un test estadístico de homogeneidad para los scores 3 y 4, por el cual se puede concluir que existe homogeneidad en el número de bacilos encontrados en ambos scores, con una confianza estadística del 95%. Por otro lado, los resultados de los análisis microbiológicos arrojaron, que de las 40 muestras enviadas con lesiones compatibles macro y microscópicas, el 17% no desarrolló en los medios de cultivo. De las correspondientes muestras, al realizar la baciloscopía antes mencionada, se habían observado: más de cinco bacilos por campo en el 11%; de uno a cinco en el 67%; y uno o ninguno en el 22%. Conclusiones. La mayor cantidad de lesiones tuberculosas se encontraron en los ganglios mediastínicos y retrofaríngeos, lo cual resulta importante tener en cuenta, sobre todo a la hora de buscar lesiones leves e indica la probable vía de ingreso del agente (respiratoria). Del análisis microscópico realizado se desprende que, a diferencia de lo que plantea Wangoo y col. (2005), en los bovinos estudiados no existe relación entre lesiones de importante evolución y la observación de bacilos en las mismas. Lamentablemente al trabajar con órganos de frigorífico, no se pueden sacar conclusiones sobre lesiones agudas o de menor tiempo de evolución. En conclusión, no parecería correcto afirmar o indicar que el hecho de observar un mayor número de bacilos en las lesiones tenga correspondencia con la virulencia de la cepa. En cuanto a los resultados de los cultivos y aislamiento, se presume que los casos negativos se deben a los tratamientos de homogenización y decontaminación que pueden afectar a las micobacterias (Latini y col. 1997). Sin embargo, tampoco se aprecia que aquellas muestras donde se observaron menor cantidad de bacilos/campo tengan mayor probabilidad de dar cultivos negativos. Este estudio forma parte de un proyecto de investigación (PICT 1114/2006) en el cual se pretende determinar si los genotipos del Mycobacterium bovis que se presentan en diversas áreas geográficas del país muestran diferencias en su capacidad de virulencia. Nuestro aporte consistió en caracterizar las diferentes lesiones halladas en órganos bovinos en faena de la provincia de Santa Fe, para su posterior genotipificación por parte de otros miembros del equipo de investigación. Identificar y caracterizar los distintos genotipos de M. bovis presentes en nuestro país, como así también determinar si existen diferencias en su virulencia en base a los cuadros anátomo-patológicos que se observan, permitirá aportar información básica útil para coordinar tareas de saneamiento en el marco de un plan de control y erradicación de esta enfermedad.