Mecanismos de acción de AGEs (productos de glicación avanzada) y Alendronato sobre células osteoblásticas en cultivo: rol del calcio y el estrés oxidativo

GAGOITI, MARÍA VIRGINIA; ARNOL, VERÓNICA; FELICE, JUAN IGNACIO; TOLOSA, MARÍA JOSÉ ANAHÍ; CORTIZO, ANA MARÍA; MCCARTHY, ANTONIO DESMOND

Mar del Plata

Congreso; LII Reunión Científica Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica y LV Reunión Científica Anual de la Sociedad Argentina de Inmunología; 2007

Sociedad Argentina de Investigación Clínica

Previamente demostramos que los AGEs (productos de glicación avanzada) producen efectos nocivos sobre los osteoblastos en cultivo, como acción pro-apoptótica, aumento del estrés oxidativo, disminución de la proliferación y de la diferenciación osteoblástica. El Alendronato (un bisfosfonato), al ser coincubado con los AGEs, es capaz de bloquear tales efectos. En este trabajo profundizamos el estudio sobre los mecanismos de acción de AGEs y Alendronato, analizando el rol del calcio y de la producción de especies de oxigeno reactivas (ROS) en células MC3T3E1. Para ello los osteoblastos se cultivaron a 37ºC, 5% CO2 en presencia de albúmina sérica bovina (BSA) o AGE-BSA (100ug/ml), con o sin Alendronato(10-8M) durante 24hs y en presencia de distintos agentes .(Vitaminas C y E, Nifedipina, BAPTA, EGTA). Los AGEs indujeron un incremento en la formación de ROS (114%basal, p<0.01) (ensayo con dihidrorrodamina 123), el cual fue bloqueado por coincubación con Alendronato. La incubación con vitaminas y Alendronato no altero la producción basal de ROS. Sin embargo, la co-incubación de vitaminas C y E, y Alendronato, o la presencia de vitaminas solas previno el estrés oxidativo inducido por los AGEs. Esto sugiere que el Alendronato actuaría evitando la generación de ROS de la misma manera que lo hacen las vitaminas C y E. Por otra parte los AGEs producen una disminución (83% basal, p<0.01) en la proliferación celular (ensayo con Cristal violeta), la cual es prevenida al preincubar las células con Alendronato. La nifedipina (inhibidor de los canales de calcio tipoL) no altero la acción deletérea de los AGEs, mientras que la co-incubación de nifedipina con Alendronato bloqueo el efecto protector del Alendronato. Estos datos sugieren que los canales tipoL-Ca juegan un rol en el mecanismo de acción del Alendronato pero no en la acción de los AGEs sobre la proliferación de osteoblastos en cultivo.