Seguimiento del crecimiento y vascularización de tumores isogénicos desarrollados en ratones Balb/cCmedc mediante Ultrasonografía Power Doppler

SALINAS F; MARELLI B; BELOTTI, E.M.; MATILLER V; DIAZ P; LÁZARO GARCÍA R; FARINA H; ALONSO D; BARAVALLE M.E; SALVETTI NR; ORTEGA H.H.

Buenos Aires

Congreso; III CONGRESO LATINOAMERICANO DE MÉTODOS ALTERNATIVOS AL USO DE ANIMALES DE EXPERIMENTACIÓN EN EDUCACIÓN, INVESTIGACIÓN E INDUSTRIA; 2018

Asociación Argentina de Ciencia y Tecnología de Animales de Laboratorio (AACyTAL)

El desarrollo de modelos tumorales isogénicos (o singénicos) frente al uso de líneas celulares de otras especies, presenta como principal ventaja el uso de animales inmunocompetentes. Esto permite estudiar el desarrollo tumoral y su respuesta a terapias en el contexto de un sistema inmune completamente funcional. Por otra parte, los métodos estándar para la determinación del tamaño tumoral, basados en el uso de calibres, tienen baja sensibilidad, poca reproducibilidad y alta variabilidad, siendo necesario el uso de un gran número de animales para la obtención de resultados estadísticamente sólidos. En particular, la ecografía Doppler, ha sido extensamente usada para analizar vascularización en tumores humanos y el modo power Doppler, es un método específico para medir el flujo sanguíneo con una alta sensibilidad. Todo esto fundamenta claramente su utilidad como técnica complementaria de alta complejidad en la ejecución de ensayos preclínicos que impliquen el análisis de la respuesta tumoral a diferentes tratamientos. Por lo tanto nos propusimos determinar la utilidad de esta tecnología en un modelo tumoral murino isogénico. Para ello se utilizaron ratones hembras de la cepa BALB/cCmedc (N=10 por línea tumoral), los cuales fueron inoculados por vía subcutánea con una suspensión de 2x105 células de las líneas tumorales F3II (carcinoma mamario murino) o CT26 (carcinoma de colon) multiplicadas in vitro. La implantación y desarrollo de los tumores fueron evaluados semanalmente utilizando un ecógrafo Doppler color (Z6 Vet, Mindray, China), con un transductor lineal de 8.0-14 MHz (LP1-6P, Mindray). En todos los casos se realizó la medición de los tumores mediante un barrido en modo B en tiempo real, obteniéndose valores de diámetro y volumen de los mismos. Luego se analizó la intensidad del flujo sanguíneo en la región tumoral mediante la función ?Power Doppler?. De esta forma fue posible detectar el desarrollo de los tumores a partir de la primera semana post-inoculacion. En conclusión, esta metodología poco invasiva y que ocasiona poco estrés a los animales, nos permite obtener medidas más precisas de los tumores que el uso del calibre, en menos tiempo de manipulación de animales (menos de 8 segundos), con una alta sensibilidad para la detección de cambios incipientes en los animales.