CONFIRMACIÓN PRECOZ DE LA INFECTIVIDAD DE LA VACUNA DE BABESIA BOVIS MEDIANTE RT-PCR

FERREIRA, M; VALENTINI, B; BARAVALLE, M; THOMPSON, C; TORIONI DE ECHAIDE, S.; ECHAIDE, I

Mercedes, Corrientes, Argentina

Otro; XVIII Reunión científica Técnica de la AAVLD; 2010

AAVLD

Babesia bovis es una de las especies causantes de la babesiosis bovina en Argentina. Provoca anemia, alteraciones en la circulación capilar, infartos en diferentes órganos y frecuentemente muerte. Su prevención se basa en el uso de cepas de B. bovis de escasa patogenicidad, en bovinos menores a 12 meses de edad. La vacuna refrigerada tiene una viabilidad de 7 días y la verificación de sus infectividad se realiza a través de ELISA e IFI, entre los 30 y 90 días después de la vacunación en no menos de un 20% de la población vacunada. Superado este límite y ante la ausencia de desafíos naturales, los niveles de anticuerpos post-vacunales comienzan a fluctuar hasta desaparecer (sin afectar la inmunidad), hecho que dificulta el diagnóstico. El período que debe transcurrir para la detección de los primeros anticuerpos post-vacunales es variable y depende de la dosis, la vía, la continuidad de la cadena de frío, tiempo transcurrido desde la su producción y en algunos casos de la raza. La infectividad de la vacuna, se puede confirmar mediante la observación microscópica de los parásitos mediante el método de gota gruesa de sangre periférica entre los días 9 y 16 post-vacunación o a través de la serología 30-60 días post-vacunación. Un método alternativo para detectar la presencia del parásito es mediante la reacción en cadena de la polimerasa (PCR). El objetivo de este trabajo fue evaluar la infectividad de una vacuna viva basada en la cepa BboR1A de B. bovis mediante PCR en tiempo real (RT-PCR), durante el período prepatente y antes de la detección de anticuerpos.El período prepatente observado en el grupo inoculado con BboR1A viva, fue de 6 días. Durante el período patente los parámetros observados coincidieron con los esperados para la cepa vacunal BboR1A. Se detectaron parásitos en todos los bovinos inoculados con la cepa viva. Los bovinos iniciaron su recuperación a los 16 días PI, período caracterizado por la dificultad para detectar parásitos. No se observaron parásitos en los bovinos inoculados con la cepa inactivada. La RTP-CR a través del tiempo evaluado mostró un perfil diferente entre los bovinos vacunados con la BboR1A viva y los inoculados con la cepa inactivada. La primera detección de B. bovis mediante RT-PCR ocurrió a las 8hs PI en el 30% de los bovinos vacunados con BboR1A viva y a las 4 hs PI en el 40% de los inoculados con la cepa inactivada. El 100% de los bovinos vacunados con la cepa viva se detectó a las 48hs y hasta los 22días PI. El % de fluorescencia máxima se detectó a los 22 días PI con 110% para la cepa viva y a las 8 h con 55% para la cepa inactivada. La temperatura de disociación del ADN para BboR1A fue de 83,5 °C.El período prepatente de 6 días se correspondió con el observado en bovinos vacunados con la cepa BboR1A en previos experimentos. RT-PCR fue capaz de identificar B. bovis, antes y después del período prepatente, en el 100% de los bovinos vacunados con la cepa viva a partir de las 48h y hasta los 29 DPI que duró este experimento, momento en el que todos bovinos vacunados tenían anticuerpos detectables por ELISA. RTPCR es una técnica complementaria o alternativa a la serología para verificar la infectividad de la vacuna en forma precoz hasta la detección de los anticuerpos, aun cuando el 100% de los bovinos no hubiera generado niveles de valor diagnóstico.