Evaluación in vitro de la actividad citotóxica y antioxidante de extractos de cáscara de nuez pecán enriquecidos en polifenoles.

RIBAS, L; GASSER FB; BARAVALLE M.E; SAVINO, G; VAN DE VELDE, F; HEIN G

Córdoba

Congreso; VII Congreso Internacional de Ciencia y Tecnología de los Alimentos; 2022

Ministerio de Ciencia y Tecnología de Córdoba- Universidad Nacional de Córdoba

Los objetivos del presente trabajo fueron: a) optimizar una metodología de preparación de extractos enriquecidos en compuestos fenólicos, a partir de un extracto crudo liofilizado obtenido de la cáscara de nuez pecán (Carya illinoinensis); b) cuantificar el contenido de fenoles totales (FT) e identificar los compuestos fenólicos; c) evaluar la actividad citotóxica y la capacidad antioxidante del extracto enriquecido en una línea celular cancerígena y una línea celular normal. La preparación de los extractos enriquecidos en compuestos fenólicos (EECF) se realizó mediante cartuchos SPE de C18 pre acondicionados con acetato de etilo, metanol y agua, partiendo del liofilizado obtenido por una metodología previamente optimizada por nuestro grupo. Se le eliminó el metanol a los EECF mediante evaporación, para finalmente resuspenderlo en agua. El contenido de FT se determinó mediante el método de Folin-Ciocalteu (mg de ácido gálico equivalente /g) y el perfil de compuestos fenólicos mediante cromatografía líquida con detección por espectrometría de masas (LC-Ms/Ms). La evaluación de viabilidad celular se realizó sobre las líneas celulares CHO-K1 (ovario de hámster chino) y MDA-MB-231 (cáncer de mama humano) mediante el ensayo de MTT durante 48 horas, utilizando concentraciones crecientes de EECF (5-200 mg/L), y empleando doxorrubicina HCl y peróxido de hidrógeno como controles positivos. Se determinó el valor de IC50 y el índice de selectividad (IS) respecto a las células normales. Además, se evaluó la actividad antioxidante de los EECF por citometría de flujo, analizando la producción de especies reactivas de oxígeno (ROS) en ambas líneas celulares tratadas con EECF a la concentración del IC50 y su combinación con doxorrubicina HCl. Los EECF mostraron valores de FT aproximadamente igual a 2,4 mg /g de liofilizado y el análisis espectrométrico permitió identificar: ácido vanílico, gálico, hidroxibenzoico, clorogénico, cafeico y propiónico, entre los de mayor abundancia, correspondiéndose con los detectados en el extracto crudo anteriormente analizado por nuestro grupo. En los estudios in vitro, se observó una curva de viabilidad celular decreciente dosis-dependiente y se calcularon las concentraciones de extractos que reducen al 50% la población celular (IC50), obteniéndose valores de 50,79 mg/L para la línea celular CHO-K1 y 27,45 mg/L para la MDA-MB-231. Además, los EECF demostraron tener un efecto citoprotector (p1), presentando además un efecto antioxidante frente a un quimioterápico ampliamente utilizado en este tipo de cáncer, potenciando aún más su uso como agente antitumoral, y de esta manera revalorizando un residuo agroindustrial.