Derivados antraquinónicos aislados de Heterophyllaea pustulata: posible mecanismo de acción como agentes antibacterianos

COMINI, L.R.; NÚÑEZ MONTOYA, S.C.; PÁEZ, P.L.; ALBESA, I.; CABRERA, J.L.

Montevideo

Congreso; V REUNIÓN DE LA SOCIEDAD LATINOAMERICANA DE FITOQUÍMICA “PROF. EMER. PATRICK MOYNA” Y I CONGRESO DE FITOTERÁPICOS DEL MERCOSUR; 2005

Sociedad Latinoamericana de Fitoquímica

Heterophyllaea pustulata Hook. f (Rubiáceas), es una especie vegetal conocida vulgarmente como "cegadera" en referencia a la pérdida de visión que provoca en los animales que la ingieren y se exponen directamente a la luz solar. A partir de sus hojas y tallos fueron aislados nueve derivados antraquinónicos (AQs) mayoritarios: soranjidiol (AQ1), 1-metil éter de soranjidiol (AQ2), rubiadina (AQ3), 1-metil éter de rubiadina (AQ4), damnacantal (AQ5), damnacantol (AQ6), 1,6-dihidroxi-7-metoxi-2metil antraquinona (AQ7), 2-hidroxi-7metil-3metoxi antraquinona (AQ8) y 5,5´-bis-(1,6-dihidroxi-2metil antraquinona) (AQ9). Previamente, hemos demostrado que éstos derivados antraquinónicos son agentes fotosensibilizantes Tipo I y/o Tipo II, con generación de anión superóxido y/o oxígeno singlete respectivamente. Numerosas sustancias naturales con propiedades fotosensibilizantes poseen variados efectos biológicos con potencial aplicación en terapéutica como agentes antivirales, antibacterianos, antifúngicos e incluso anticancerígenos. En estudios farmacológicos previos, demostramos que los extractos enriquecidos en antraquinonas obtenidos a partir de. H. pustulata, poseen actividad antibacteriana sobre Staphylococcus aureus. De acuerdo a estos antecedentes se decidió examinar la actividad antimicrobiana de las AQs aisladas de esta especie e investigar si dicha capacidad antibacteriana radica en una acción estresante sobre la bacteria sensible, involucrando un aumento de radicales libres e incluso determinar si dicho efecto es aumentado por acción de la luz. En esta oportunidad, se trabajó con una cepa de referencia de Staphylococcus aureus (ATCC 25923) y los valores de CIM para cada AQs fueron determinados en medio líquido usando Caldo Mueller Hinton, empleando un inóculo de 1x105 ufc/ml. Para determinar si existía una acción estresante se utilizó un ensayo fotobiológico indirecto que evalúa la reducción de Nitroblue Tetrazolium (NBT) por acción del anión superóxido producido por las bacterias en presencia de un agente oxidante (AQs). Las concentraciones de AQs usadas para este ensayo fueron 3,2 y 32 mg/ml bajo condiciones de oscuridad y radiación UV (290-400 nm). Cuatro de las nueve antraquinonas ensayadas, AQ1, AQ5, AQ3 y AQ9, demostraron poseer actividad antibacteriana con valores de CIM entre 32 y 64 mg/ml. La producción basal de radicales del oxígeno en la cepa estudiada se incrementó en presencia de las cuatro AQs probadas y este aumento fue aún mayor, en todos los casos, en presencia de luz. Por lo tanto este efecto antibacteriano presente en AQ1, AQ5, AQ3 y AQ9 estaría correlacionado con la estimulación del metabolismo oxidativo mediante un incremento de  anión superóxido (estrés oxidativo) y además, podría ser incrementado en presencia de luz porque para las cuatro AQs se observó una fotoestimulación del estrés oxidativo.