Association studies between a complex of Re(I) and biopolymers

FABRICIO RAGONE; HECTOR H. MARTINEZ SAAVEDRA; PABLO F. GARCÍA; EZEQUIEL WOLCAN; GUSTAVO T. RUIZ

Cordoba

Congreso; 16th International Congress on Photobiology; 2014

International Union of Photobiology

Estudios de asociación entre el complejos de Re(I) y biopolímeros Fabricio Ragone1, Hector H. Martinez Saavedra1, Facudo Garcia2, Gustavo T. Ruiz1 y Ezequiel Wolcan1 1 Instituto de Investigaciones Fisicoquímicas Teóricas y Aplicadas (INIFTA, UNLP, CCT La Plata-CONICET), Diag. 113 y 64, Sucursal 4, C.C. 16, 1900 La Plata, Argentinae-mail: gruiz@inifta.unlp.edu.ar fragone@inifta.unlp.edu.ar2 [INFIQC] - Inst. de investigaciones en físico-química, Universidad Nacional de Córdoba, Córdoba, ArgentinaEl estudio de las propiedades fotofísicas de complejos metálicos constituidos por un fragmento fac-{ReI(CO)3} y diferentes ligandos diiminas coordinadas, es un campo de investigación que se ha mantenido activo en el tiempo debido a la gran diversidad respecto a su reactividad química y fotoquímica, así como a sus potenciales aplicaciones en distintas áreas.1 Se ha demostrado que muchos de ellos son emisores eficientes y que pueden ser de gran utilidad en diferentes sistemas biológicos como sensores ópticos, fotosensibilizadores, fotocatalizadores, etc. Debido a sus propiedades redox y fotofísicas, algunos de estos complejos tienen la capacidad de causar daño al ADN cortando la cadena producto de procesos oxidativos fotoinducidos.2 Estos complejos metálicos en los últimos años han sido estudiados como potenciales fotosensitizadores para la terapia fotodinámica (PDT: Photodynamic Therapy). El uso de proteínas de transporte para lograr una acumulación específica, de droga, en células neoplásicas parece ser un área de gran estudio por lo que se buscó determinar y caracterizar la asociación de complejos metálicos de Renio a proteínas de transporte, específicas (Transferrina) e inespecíficas (Albúmina Sérica Bovina y Humana), con el fin de determinar el potencial uso de estos complejos en el delivery de drogas. En este trabajo se muestran resultados de tres grupos de experimentos realizados con el complejo sintetizado por nuestro grupo ReI(CO)3(pterina)(H2O) (pterina = 2-amine-4-pteridinona)3.El primero grupo de ensayos consta de los estudios de interacción del complejo con polinucleótidos naturales (ADN de timo de ternero y plásmidos bacterianos) y sintéticos (poli-dAdT y opoli-dCdG), mediante los cuales se determinaron los modos de interacción y los valores de sus constantes realizando experimentos de quenching del tipo stern-volmer. El segundo grupo de estudios consta de los resultados de las medidas de interacción con proteínas de transporte como la HSA (human serum albumine), la BSA (Bovine serum albumine) y la Apo-Transferrina.Mediante el ensayo de desactivación de la fluorescencia de la proteína en presencia de diferentes concentraciones de complejo se determinaron parámetros termodinámicos y la constante de asociación (Kb). Se exploraron las distancias entre la proteína y el complejo utilizando la resonancia de transferencia de energía de Förster (FRET). Se determinó el sitio de asociación para el complejo. Usando dicroísmo circular, se estudiaron los cambios conformacionales cuando la proteína se asocia al complejo. El último grupo de experimentos se basó en la obtención de imágenes mediante microscopia AFM de los aductos formados entre el complejo y diferentes plásmidos bacterianos. Estos aductos se obtuvieron por incubación y luego se observaron los cambios fotoinducidos al irradiar la muestra. Este trabajo fue financiado en parte por ANPCyT (PICT 1435), CONICET (PIP 0389) y Universidad Nacional de La Plata (UNLP 11/X533 y 11/X611) con colaboración de la Universidad Nacional de Córdoba.Referencias 1- A. Kumar, S. Sun and A. J. Lees. Top Organomet. Chem., 29, 1, 20102- J. A. Smith, M. W. George and J. M. Kelly. Coord. Chem. Rev., 255, 2666, 20113- F. Ragone, G. T. Ruiz, O. E. Piro, G. A. Echeverría, F. M. Cabrerizo, G. Petroselli, R. Erra-Balsells, K. Hiraoka, F. S. García Einschlag and E. Wolcan. Eur J Inorg. Chem., 4801, 2012