Fototoxicidad generada por riboflavinas en cultivo de queratinocitos

JUAREZ ANDREA VIRGINIA

Córdoba

Jornada; XI Jornadas de Investigación Científica; 2010

Facultad de Ciencias Médicas, Universidad Nacional de Córdoba.

La Terapia Fotodinámica (TFD) es un tratamiento antitumoral que se basa en la muerte celular luego de la activación lumínica de un fotosensibilizador (FS). Dependiendo de la intensidad y tipo de estimulo, la muerte celular se produce por necrosis o apoptosis. La Riboflavina (RF), molécula hidrosoluble, por su alto potencial redox podría utilizarse en la aplicación de TFD, con el objeto de aumentar su permeabilidad celular, hemos modificado su estructura confiriéndole carácter lipofílico. Objetivo: Evaluar la toxicidad y determinar el tipo de muerte generado por TFD mediada por RF Liposoluble (RFL) y RF Hidrosoluble (RFH) en células de carcinoma escamoso de la línea SCC-13. Mat y Met: Células SCC-13 fueron incubadas en medio DMEM con RFL o RFH a 100 y 50mM, durante 30?, e irradiadas con una lámpara (150mW/cm2, 475nm) a densidades de energía de 10, 25, 50, 75 J/cm2. Posteriormente se realizó la detección de: a) viabilidad celular mediante la técnica del rojo neutro, b) proliferación celular por inmunohistoquímica de Ki-67 y c) tipo de muerte celular mediante la traslocación de fosfatidil serina (Anexina V/IP) por citometría de flujo. Análisis estadístico ANOVA-Tuckey. Resultados: La viabilidad celular disminuyó con RFL (100 y 50mM) con dosis de luz mayores a 25J/cm2 y con RFH (100 y 50mM) con dosis de luz mayores a 50J/cm2. La proliferación celular con ambas RF disminuyó significativamente tanto a 50J/cm2 como a 75J/cm2. Con la activación de ambas RF (50mM; Luz 50J/cm2) se indujo muerte celular por apoptosis y necrosis, sin embargo RFH generó mayor número de apoptosis que RFL. Conclusión: Estos resultados permiten concluir que RFH requiere mayor dosis de luz para su activación, sugiriendo que RFL podría funcionar con mayor efectividad en TFD. A futuro se pretende ajustar la dosis de RFL y de luz para lograr mayor muerte celular por apoptosis.