Respuesta morfológica de células hipofisarias al estrés oxidativo producido por la Riboflavina

JUAREZ VIRGINIA; LEIMGRUBER CAROLINA; PALMERI CLAUDIA; GUTIERREZ SILVINA; TORRES ALICIA

Cordoba

Congreso; XI Congreso Argentino de Ciencias Morfologias; 2008

Sociedad Argentina de Ciencias Morfologicas

Introducción: La Terapia Fotodinámica (TFD) es un método terapéutico utilizado en la actualidad, consiste en el uso de luz para la activación de fotosensibilizadores acumulados en células blanco, generando especies reactivas de oxígeno (ROS) que producen la muerte de estas células. Objetivos: Analizar ultraestructuralmente la respuesta de células hipofisarias a la TFD mediada por riboflavina (Rf) determinando el tipo de muerte celular y demostrar si se genera oxígeno singlete (1O2) en este mecanismo. Mat y Met:. Células dispersas de tejido hipofisario fueron obtenidas por incubación con tripsina en medio DMEM. G1: control, G2: se iluminó por 30? (3w,= 450-480 nm), G3: se le agregó Rf y se mantuvo en la oscuridad, G4 se le agregó Rf y se iluminó por 30?. Para constatar la generación de ROS por parte de la RF se utilizó 3OH piridina, droga que sólo se descompone en presencia de 1O2. Resultados: La absorbancia de la 3OH piridina decayó de 0,5 a 0,37 en 2? demostrando la generación de 1O2. La ultraestructura en los grupos G1 y G3 está conservada, en el G2 se observan algunas células con condensación de la cromatina y citoplasma vacuolado, mientras que en G4 la mayoría de las células presentan alteraciones en el núcleo (condensaciones y fragmentaciones compatibles con apoptosis) o en el citoplasma, (organelas dañadas y pérdida de la membrana compatible con necrosis). La viabilidad celular fue en G1: 83%, G2:74%, G3:82% y G4:10%. Conclusión: El análisis por microscopía electrónica demostró un daño severo en las células hipofisarias producto del ROS generado por la Rf que lleva a la muerte por dos mecanismos distintos: apoptosis y necrosis.