FOTOTOXICIDAD GENERADA POR RIBOFLAVINAS EN CULTIVO DE QUERATINOCITOS

JUAREZ A; PALMERI C; SOSA L; BOETTO N; PITTAU R; HAGGI E; TORRES A; PONS P

MEDICINA (BUENOS AIRES)

MEDICINA (BUENOS AIRES)

Lugar: Buenos Aires; Año: 2010 vol. 70 p. 126 - 127

0025-7680

La Terapia Fotodinámica (TFD) es un tratamiento antitumoral que se basa en la muerte celular luego de la activación lumínica de un fotosensibilizador (FS). Dependiendo de la intensidad y tipo de estimulo, la muerte celular se produce por necrosis o apoptosis. La Riboflavina (RF), molécula hidrosoluble, podría utilizarse como FS en TFD. Para aumentar su permeabilidad celular, se acetiló la molécula obteniendo un compuesto lipofílico. Objetivo: Evaluar la toxicidad y determinar el tipo de muerte generado por TFD mediada por RF Hidrosoluble (RFH) y RF Liposoluble (RFL) en células de carcinoma escamoso (SCC-13). Las células se incUBAron en medio DMEM con RFL o RFH (100 y 50mM), por 30min y se irradiaron con una lámpara (150mW/cm2, l475nm) a densidades de energía de 25, 50, 75J/cm2. Se analizó: viabilidad celular mediante rojo neutro, proliferación celular por inmunocitoquímica de Ki-67 e incorporación de BrdU, muerte celular apoptótica y necrótica por citometría de flujo (Anexina V/IP) y respuesta ultraestructural por microscopía electrónica (ME). Análisis estadístico ANOVA-Tuckey. RFL a dosis de luz mayores a 25J/cm2 y RFH a dosis de luz mayores a 50J/cm2 disminuyeron la viabilidad celular (p menor a 0.001 vs controles). La proliferación celular disminuyó tanto a 50J/cm2 como a 75J/cm2 con ambas RF (p menor a 0.001 vs controles). Con la activación lumínica de 50J/cm2 ambas RF (50mM), produjeron muerte celular; sin embargo, RFH generó mayor porcentaje de apoptosis, mientras que RFL indujo principalmente necrosis (p menor a 0.05). La ME no evidenció una respuesta específica para cada tratamiento, observándose un amplio rango de signos, desde polarización de las organelas hasta total destrucción celular. Estos resultados permiten concluir que ambas RF pueden utilizarse como FS en TFD. La RFH requiere mayor dosis de luz para su activación, sugiriendo que RFL podría funcionar con mayor efectividad. El próximo objetivo es lograr mayor muerte celular apoptótica ajustando la dosis de luz y de FS.