Obtencion de un anticuerpo monoclonal que distingue Entamoeba histolytica-dispar de otra amebas patogenas

ALICIA SAURA; PEDRO G. CARRANZA; HUGO D LUJAN

Cordoba

Jornada; 9vas Jornadas de Investigacion Cientifica de la Facultad de Ciencias Medicas; 2008

Universidad Nacional de Cordoba

El diagnóstico de la amebiasis, causada por Entamoeba histolytica, es difícil debido a la presencia de cepas patógenas y no patógenas tanto de E. histolytica como de E. dispar. El diagnóstico se realiza visualizando al microscopio óptico los quistes (forma infectante) y los trofozoítos (forma vegetativa) en las heces de pacientes. Por la similitud morfológica con otras amebas, se sobre-diagnostica la enfermedad, dando lugar a tratamientos innecesarios con drogas que poseen efectos adversos. Para obtener una herramienta sensible y especifica en el diagnóstico se desarrollaron anticuerpos monoclonales (mAbs) contra quistes aislados de pacientes con amebiasis y trofozoítos de E. histolytica mantenidos en cultivo. Se inmunizaron ratones BALB/c, luego de extraídas las células del bazo, se fusionaron con células de mieloma NSO. Se analizó el medio de cultivo de los hibridomas formados por IFA y ELISA, siendo el hibridoma 6C12 específico contra quistes y otros sólo contra trofozoítos. El mAb 6C12 fue analizado en más de 100 muestras de pacientes infectados con E. histolytica y E. dispar, caracterizadas por PCR, y fijadas con diferentes métodos dando excelentes resultados en todos los casos. Para verificar la especificidad se testearon más de 50 muestras conteniendo quistes de otras amebas y de otros parásitos, siendo en todos los casos no reactivo. Esta herramienta permitirá el diagnóstico preciso de E. histolytica-dispar y, por ende, el tratamiento adecuado.