ESTUDIO DE LA CASCADA DE SEÑALIZACIÓN INICIADA POR AMPC DURANTE LA REACCIÓN ACROSOMAL

BRANHAM MT; ZARELLI VEP; RODRIGUEZ JF; TOMES CN

Mendoza

Jornada; IX JORNADAS DE INVESTIGACIÓN DE LA FACULTAD DE CIENCIAS MÉDICAS; 2007

La reacción acrosómica (RA) es un proceso que habilita a los espermatozoides para penetrar la zona pelúcida y fusionar con la membrana plasmática del ovocito. Nuestro laboratorio ha descripto un camino de señalizacion por el cual AMPc induce RA por medio de Epac. Epac es un intercambiador de nucleótidos de guanina para las proteínas G de bajo peso molecular Rap. Por medio de la activación de Rap, AMPc influencia diversos procesos celulares, incluyendo regulación de la proliferación, adhesión y secreción. Objetivos Estudiar componentes downstream de la cascada de señalización iniciada por Epac. Determinamos la presencia y localización acrosomal de Rap1 por medio de Western blot e inmunofluorescencia. Su participación en la RA y su ubicación en la cascada de señalización se detectaron mediante ensayos con espermatozoides permeabilizados con estreptolisina O. La activación de Rap se evaluó mediante un pull down assay. Ensayos funcionales y de pull down establecieron que Epac activa indirectamente a Rab3A, otra proteína esencial para la RA Conclusiones Rap está presente en espermatozoides humanos y presenta localización acrosomal Rap es requerida para la RA Calcio induce la activación de Rap Epac activa indirectamente a Rab3A