Avaliação da Atividade antifúngica e citotóxica de semicarbazonas e tiossemicarbazonas frente a fungos micotoxigênicos de interesse agropecuário

PAIVA RO; KNEIPP L; GOULART C M; CARIDDI LN; ESCOBAR FM; SABINI LI; ECHEVARRIA A

Congreso; XXVII Reunião Anual da Federação de Sociedades de Biologia Experimental - FeSBE; 2012

ResumoObjetivosMicotoxinas são metabólitos secundários produzidos por fungos, identificadas em diversos produtos agrícolas, representando um sério fator de risco para a saúde humana e animal. Nosso objetivo foi avaliar a atividade antifúngica de substâncias da classe semicarbazonas (SM 1-9) e tiossemicarbazonas (TS 1-8), sintetizadas e caracterizadas por técnicas espectroscópicas, através do método de microdiluição em caldo, segundo norma preconizada pela CLSI (documento M38-A), frente aos fungos micotoxigênicos Aspergillus flavus, A. nomius, A. ochraceus, A. parasiticus e Fusarium verticillioides e, também, sua toxidez frente a células Vero e células mononucleares de sangue periférico humano (protocolo nº 2 no Comité Institucional de Ética de la Investigación en Salud-CIEIS do Instituto Médico Río Cuarto S.A., Río Cuarto, Argentina). MétodosAs substâncias foram solubilizadas em DMSO: TWEEN 20: meio RPMI 1640 na razão 1:1:8. As amostras fúngicas foram obtidas na coleção micológica Trichomonaceae do Instituto Oswaldo Cruz, FIOCRUZ-RJ. Foram determinadas as concentrações mínimas inibitórias (MIC) e as concentrações mínimas fungicidas (MFC) frente aos fungos micotoxigênicos nas concentrações de 500, 250, 125, 62,5, 31,2 e 15,6 g/mL. A toxidez foi avaliada frente a células mononucleares de sangue periférico humano utilizando o corante de exclusão Azul de Trypan. A viabilidade celular utilizando células Vero (clone 76, Cercopithecus aethiops kidney) foi determinada pelo teste de absorção de Vermelho Neutro (NRU). Todos os experimentos foram realizados em triplicata. Protocolo nº 2 no Comité Institucional de Ética.ResultadosA classe das TS foi a mais efetiva. A TS-6 apresentou MIC igual a 250 g/mL para A. nomius, A. ochraceus e A. parasiticus e MIC de 500 g/mL para A. flavus e F. verticillioides. Enquanto que, TS-3 inibiu 100%, na concentração de 500 g/mL, o crescimento de A. flavus, A. parasiticus e F. verticillioides, a TS-8 inibiu 100%, na concentração de 500 g/mL, o crescimento de A. flavus e A. parasiticus, este, também teve o crescimento inibido (MIC = 500 g/mL) pelas TS-1, TS-2, e TS-4. Dentre as SM ensaiadas, SM-1 e SM-4 afetaram somente o crescimento de A. flavus e F. verticillioides (MIC = 500 g/mL). No ensaio da concentração mínima fungicida (MFC), todas as SM e as TS (TS-3 e TS-6) apresentaram efeito fungistático (MFC > 500 g/mL) frente às amostras fúngicas, e a TS-6 efeito fungicida contra F. verticillioides (MFC = 500 g/mL). Os ensaios de citotoxicidade frente às células mononucleares e células Vero, realizados com as substâncias que apresentaram atividade antifúngica (SM-1, SM-2, TS-6), mostraram que as SM não foram tóxicas nas concentrações ensaiadas. No entanto, a TS-6 apresentou efeito citotóxico frente aos dois tipos de células avaliadas.ConclusãoAs TS e SM apresentaram atividade antifúngica, podendo se tornar uma alternativa como medida profilática ao crescimento fúngico e produção de micotoxinas.