Polifenoles reducen los efectos toxicos de ocratoxina A en células Vero y linfocitos murinos.

CARIDDI LN; SABINI MC; MONTIRONI I; ESCOBAR FM; RESER AL; SABINI L; DALCERO A

Congreso; XIII Congreso Argentino de Micología. XXIII Jornadas Argentinas de Micología. 1º Reunión de la Asociación Micológica Carlos Spegazzini.; 2014

Ocratoxina A (OTA) es una de las micotoxinas más comunes y peligrosas en los alimentos y piensos. Esta toxina presenta propiedades nefrotóxicas, genotóxicas e inmunotóxicas. Diversos reportes revelan que compuestos naturales con propiedades antioxidantes, son eficaces para reducir los efectos tóxicos de las micotoxinas. Baccharis articulata Lam Pers (Asteraceae) es una planta utilizada en medicina popular por su potente actividad antioxidante. Se identificaron y cuantificaron por HPLC los principales componentes del extracto acuoso frío de B. articulata que fueron luteolina (L) (1.96 ± 0.27%), acacetina (A) (1.12 ±0.14%) y ácido clorogénico (AC) (0.29±0.05%). Ácido cafeico (ACaf) no fue identificado, sin embargo fue incluido en los estudios por ser un compuesto presente en B. articulata con potente actividad antioxidante. Se determinaron los efectos citotóxicos in vitro de diferentes concentraciones de estos compuestos (5, 10, 50, 100, 200 y 300 µg/ml) y de OTA (2,5, 5, 10, 50, 75 y 100 µg/ml) sobre linfocitos de ratas Wistar y células Vero, en ensayos independientes y en combinaciones. La determinación de la viabilidad celular se realizó por el test de captación del rojo neutro y reducción del MTT en células Vero y por el método de exclusión al azul de tripán y reducción del MTT en linfocitos murinos. Como se esperaba, los resultados corroboraron que OTA ejerció efectos tóxicos sobre ambos tipos celulares a todas las concentraciones ensayadas disminuyendo la viabilidad de células Vero en más del 50% y la viabilidad de linfocitos murinos entre 50 y 75%. Esta micotoxina afectó la función lisosomal y mitocondrial de las células Vero y resultó más tóxica para linfocitos murinos alterando la integridad de la membrana plasmática y la función mitocondrial. De los compuestos puros, L y ACaf resultaron levemente tóxicos para las células; A y AC no alteraron la viabilidad celular independientemente de la concentración ensayada. Los ensayos de protección se realizaron por combinación de los compuestos puros (a concentraciones no citotóxicas) con OTA (5 y 10 µg/ml). Se realizó un tratamiento conjunto (OTA+compuesto) y un pre-tratamiento celular con los compuestos durante 2 h y luego el agregado de OTA. L y ACaf (50 y 75 µg/ml) y AC (100 y 200 µg/ml) mostraron un potente efecto protector en células Vero alcanzando valores de viabilidad similares a los de las células control. En linfocitos murinos el efecto protector fue menor con valores de viabilidad de 70-80% para las células tratadas con AC y de 70-75% para las células tratadas con L. No se observaron diferencias estadísticas significativas entre el tratamiento conjunto y el pre-tratamiento. Estos estudios permitieron definir la selectividad de acción de los compuestos ensayados, mostraron la capacidad bioprotectora de los mismos sobre el daño celular inducido por OTA y sirven de base para continuar en esta línea de investigación mediante estudios in vivo en un modelo experimental murino.