Evaluación de genotoxicidad de extracto acuoso caliente de Baccharis articulata por test de Allium cepa L

TORRES C; COMINI L; CARIDDI LN; SABINI C; ESCOBAR F; SUTIL S; ZANON S; NUÑEZ MONTOYA S; SABINI LI

Congreso; IX Congreso Internacional de Biotecnología Vegetal; 2013

Las plantas medicinales proveen de una amplia variedad de sustancias químicas con potenciales acciones antimicrobianas y numerosos productos vegetales que son cada vez más consumidos en el mundo. La especie Baccharis articulata, de distribución mundial, es particularmente abundante en las serranías cordobesas de Argentina y es muy empleada por la medicina folclórica regional para la cura de diversas dolencias, en especial para afecciones digestivas por su acción hepatoprotectora, colerética y colagoga. Esta especie se encuentra incorporada en variadas formulaciones de gran consumo alimenticio humano, la mayoría con base acuosa, [Nuñez y Cantero, 2000; Alonso y Desmarchelier, 2006; Juliani y col., 2007; Vivot Lupi y col., 2009; Vieira y col., 2011]. En estudios previos hemos demostrado que el extracto acuoso caliente (EAC) y etanólico de Baccharis articulata ejercen acción antiviral contra el virus Herpes virus suis tipo 1 a concentraciones no citotóxicas en células Vero, sin ejercer tampoco muerte celular por apoptosis en células mononucleares de sangre periférica humana, [Zanon et al., 1999; Torres et al., 2011; Cariddi et al., 2012]. El propósito de este trabajo fue evaluar, por ensayos in vivo, la capacidad genotóxica del EAC de B. articulata desarrollando el test de Allium cepa L. según lo descripto por Fiskejö (1993, 1994, 1997), con algunas modificaciones. De manera paralela se efectuaron ensayos de análisis químicos preliminares para definir la presencia de principales compuestos químicos, a través de técnicas cromatográficas, espectroscópicas y cromatografía liquida de alta eficacia (HPLC), que según antecedentes bibliográficos sobre la especie se indican que registra las siguientes familias de compuestos: terpenoides, ácidos orgánicos y flavonas, [De Oliveira, 2003; Gianello, 2000; Verdi, 2005; Martino, 1989; Torres Osuna, 2005]. En el ensayo de citogenotoxicidad las 5 concentraciones ensayadas de EAC se encontraron entre 600 a 4.800 µg/ml, sometiendo grupos de 4 bulbos de cebollas a tratamientos de exposición sostenida durante 2 y 5 días, además de un estudio de reversión de daño que implicó un tratamiento de 2 días con EAC y luego 3 días con agua mineral. En todos los caso se determinaron valores de índices mitóticos (IM) e índices de fases (IF) y por evaluación de daños macroscópicos, índices de toxicidad. Los resultados obtenidos revelaron que en las células ocurrió una disminución del índice mitótico (IM) del 50% o más, con arresto en interfase para todas las concentraciones ensayadas en los tratamientos sostenidos de 2 y 5 días, con presencia significativa de micronúcleos (MN) a altas concentraciones. Estos datos fueron consistentes con la capacidad tóxica del EAC que produjo destrucción celular a partir de 2.400 µg/ml (2 días) y a partir de 1.200 µg/ml (5 días). El ensayo de reversión mostró que todos los efectos nocivos fueron revertidos a concentraciones  a 3.600 µg/ml de EAC, valor 6 veces superior a la concentración efectiva antiviral. En relación al estudio fitoquímico del extracto de B. articulata se confirmó la presencia de ácido clorogénico, quercetina (componente mayoritario identificado), luteonina y acacetina, sustancias que podrían ser responsables de la acción citogenotóxica y antiviral. Este estudio confirma que las concentraciones del EAC de B. articulata, que resultan con capacidad para inhibir la multiplicación del virus Herpes suis en células eucariota, son seguras de aplicar a futuro como droga antiviral en virtud de su nulo poder citogenotóxico, y estimulan su uso como fitofármaco.