Extracto acuoso caliente de Achyrocline satureioides: Estudios citogenotóxicos preliminares

CARIDDI LN; SABINI C; ESCOBAR F; ZAMORA F; MALDONADO AM; REINOSO E; SABINI LI

Tafí del Valle (Tucumán)

Congreso; XXVII Jornadas Científicas, Asociación de Biología de Tucumán; 2010

Achyrocline satureioides posee actividad antioxidante, inmunoestimulante y antialérgica. Sin embargo existen escasos estudios que evalúen su acción tóxica sobre células normales. El objetivo fue determinar la actividad genotóxica in vivo sobre eritrocitos de médula ósea de ratón y citototóxica in vitro sobre linfocitos humanos del extracto acuoso caliente (EAC) de A. satureioides. Se obtuvieron linfocitos de sangre periférica de humanos sanos por gradiente de densidad con Histopaque y se enfrentaron al EAC (50, 100, 200, 400, 600, 800 y 1000 μg/mL) por 18-24 h. Su toxicidad fue evaluada por: a) Tinción de exclusión al azul de tripán, b) Reducción del MTT. Para determinar si la muerte celular fue debida a la inducción de apoptosis, se realizó un análisis de fragmentación de ADN por electroforesis en gel de agarosa. La genotoxicidad se evaluó por el Test de Micronúcleos. Ratones BALB/c fueron inyectados con EAC (500, 200 y 100 mg/Kg). Control negativo: solución fisiológica; Control positivo: Ciclofosfamida (20mg/kg). Los animales se sacrificaron a las 24 h post-inyección. Muestras de médula ósea se fijaron y tiñeron con May-Grünwald y Giemsa. Se contaron 1000 eritrocitos policromáticos (EPC) para determinar número de micronúcleos (MN) y EPC/250 eritrocitos normocromáticos (ENC) para calcular índice de toxicidad (IT). Se demostró toxicidad dosis-dependiente del EAC sobre linfocitos humanos tanto por tinción de exclusión al azul de tripán (CC50=670 ug/mL) como por reducción de MTT (CC50>200 ug/mL). El método colorimétrico del MTT resultó más sensible. La electroforesis de ADN en gel de agarosa no mostró un patrón de fragmentación característico de apoptosis en los linfocitos tratados con EAC. El número de EPCMN para control negativo fue: 5(+1), control positivo: 62(+13) y EAC en sus tres dosis: 28(+5), 12(+3) y 4(+1). IT para control negativo: 1,38(+0,35); control positivo: 3,1(+1,06) y EAC en sus tres dosis: 0,30(+0,05); 0,22(+0,08) y 0,23(+0,02). Los ensayos preliminares demostraron que EAC de A. satureioides a bajas concentraciones no induciría apoptosis ni mutagenicidad en células normales. Sin embargo la disminución de EPC/ENC indicaría un efecto tóxico sobre células precursoras de la médula ósea.