Resistencia derivada del patógeno en cítricos transgénicos que expresan la proteína de la cápside de Citrus psorosis virus

ZANEK MC; REYES CA; PEÑA EJ; VELÁZQUEZ K; PLATA MI; COSTA N; GRAU O; GARCIA ML

Viña del Mar, Chile

Congreso; VI Encuentro Latinoamericano y del Caribe de Biotecnología Agropecuaria,; 2007

REDBIO

En la región mesopotámica argentina y en San Pedro (Buenos Aires) la psorosis causa la muerte anual del 5% de las plantas productoras de cítricos. El agente causal, Citrus psorosis virus (CPsV) infecta la mayoría de las variedades de los cítricos comerciales y todas las especies relacionadas utilizadas como pie. No se conocen Citrus resistentes o tolerantes a la enfermedad. CPsV (Ophiovirus) posee un genoma negativo segmentado de RNA simple cadena. El RNA 1 contiene dos ORF, la RNA polimerasa (280K) y un polipéptido (24K) de función desconocida. El RNA 2 codifica un polipéptido (54K) de función desconocida y el RNA 3 la proteína de cubierta viral (CP o 48K). Por sus características epidémicas, el control de la enfermedad y su erradicación son difíciles de efectuar. La resistencia deriva del patógeno (PDR) se ha aplicado con éxito para el control de diversas enfermedades producidas por agentes virales. En muchos casos, la expresión de la CP ha generado resistencia o tolerancia al virus sin producir efectos secundarios. Se han obtenido 21 líneas transgénicas de naranjo dulce Pineapple que contienen el ORF 48K, poseen entre 1 y 3 copias integradas del transgén y presentan diferentesniveles de expresión de la proteína CP. Debido a que la transmisión del virus se realiza mediante injerto (cuya carga viral es alta), se realizaron ensayos para determinar la menor carga viral capaz de infectar un cítrico no transgénico. Utilizándose este inóculo se realizó el desafío de 5 líneas transgénicas CP con el aislamiento homólogo (CPV-4).  El ensayo fue observado y analizado durante un año encontrándose que todas las líneas manifestaron los síntomas característicos de psorosis en el invernadero, sin presentar resistencia o tolerancia a CPsV ni retardo en la aparición de los síntomas. Una de las líneas contiene 3 copias del transgén, expresa baja cantidad de mRNA, no se detecta expresión de la proteína CP y además su ORF esta metilado, sugiriendo inducción del PTGS. Sin embargo, no presentó protección en las condiciones ensayadas. Actualmente se cuenta con varias líneas transgénicas CP candidatas a presentar PDR, las cuales serán desafiadas para analizar su resistencia a CPsV.