Desarrollo de portainjertos de cítricos transgénicos que expresan péptidos antimicrobianos

GARDELLA VICTORIA; REYES CARINA ANDREA; FURMAN NICOLAS; CONTI GABRIELA; GOCHEZ ALBERTO; GOMEZ CLAUDIO; KOBAYASHI KEN; HOPP ESTEBAN; CANTEROS BLANCA; GARCIA ML

Congreso; IV Congreso Argentino de Microbiología Agrícola y Ambiental; 2018

El cultivo de cítricos en Argentina se extiende en dos regiones: el Noroeste (NOA), donde se producen naranjas, pomelos y limones y el Noreste (NEA), donde predominan los cultivos de naranjas y mandarinas. En el mundo, la Argentina es el octavo productor de cítricos y primer productor mundial de limones.Las enfermedades bacterianas más importantes en cultivos cítricos son las causadas por Xanthomonas axonopodis pv. citri, Xylella fastidiosa y Candidatus Liberibacter asiaticus, produciendo la cancrosis de los cítricos, la clorosis variegada de los cítricos y el Huanglongbing (HLB), respectivamente. Estas enfermedades causan una grave disminución en la producción, llevando eventualmente a la muerte de los árboles infectados, con un sustancial impacto económico. Se proponen diferentes estrategias para la generación de resistencia a estas enfermedades y la expresión mediante transgénesis de péptidos antimicrobianos se plantea como muy promisoria. El objetivo del presente trabajo es la obtención de portainjertos transgénicos que expresen el péptido antimicrobiano Lisozima (LYZ). Para el desarrollo del trabajo se utilizó la siguiente metodología: Se verificó la construcción genética (vector binario) que lleva el cassette de expresión del gen LYZ mediante secuenciación y se transformó la cepa EHA105 de Agrobacterium tumefaciens. Se optimizó la metodología de transformación genética del portainjerto Citrange troyer incluyendo condiciones de crecimiento in vitro, composición de medios, selección de explantos de partida, etc. Se transformaron segmentos internodales seccionados de plántulas crecidas in vitro y se regeneraron también in vitro brotes transformados los cuales fueron evaluados por visualización de la proteína GFP, presente en la construcción. Se injertaron in vitro los brotes positivos en pies etiolados para su crecimiento y posterior multiplicación. Así se obtuvieron un grupo de 30 plántulas que se están analizando por PCR.Las líneas transgénicas generadas serán posteriormente multiplicadas y desafiadas con las bacterias patógenas en cuestión. Si los portainjertos resultan resistentes se podrán utilizar como pie para variedades cítricas de interés a las que podrían potencialmente transmitir la resistencia o tolerancia.