Estudio del movimiento sistémico del virus de la psorosis de los cítricos desde un pie de naranjo dulce transgénico resistente a una copa no resistente

DE FRANCESCO A; REYES CA; ROBLES LUNA G; OCOLOTOBICHE E; BORNIEGO, MB; COSTA N; GARCIA ML

Buenos Aires

Congreso; Congreso Argentino de Virología; 2011

Introducción: Citrus psorosis virus (CPsV) es el agente causal de la psorosis de los cítricos. Pertenece al género Ophiovirus, familia Ophioviridae recientemente descripto. Posee un genoma tripartito a RNA de simple hebra, polaridad negativa y morfología circular, que codifica para la Polimerasa, la proteína de cubierta (CP) y otras dos proteínas de 24 y 54 kDa de tamaño cuya función está estudiándose, denominadas 24K y 54K respectivamente (García et al, J Gen Virol. 1994 Dec;75 ( Pt 12):3585-90.). Se han obtenido líneas transgénicas de naranjo dulce pineapple (NDP) que expresan estructuras hairpin derivadas de la CP viral (ihpCP), capaces de inducir Silenciamiento génico post transcripcional (PTGS) e impedir la infección mediante resistencia derivada del patógeno (Reyes et al, Journal of Biotechnology 2011 151(1):151-8). Objetivo: Evaluar la capacidad de movimiento sistémico de CPsV en injertos de cítrico desde un puente transgénico resistente al virus, hacia el pie y la copa. Metodología: Se generaron híbridos constituidos por un pie limón rugoso (LR), un puente NDP ihpCP (líneas 10 y 15) previamente inoculadas con CPsV, al que resultaron resistentes; y una copa NDP no transgénica (wt), o bien transgénica portando el gen CP completo (Zanek et al, Plant Cell 2008 Rep27:57-66). La evaluación de la infección se realizó por observación de síntomas de psorosis (clorosis y necrosis foliar), ELISA (Zanek et al, Journal of Virological Methods 2006 137: 245-251) y RT PCR. Resultados: Los híbridos cuyo puente pertenece a la línea ihpCP 10 arrojaron resultados positivos para la infección de los pies LR (8 individuos) y de las 4 copas wt, mientras que las 4 copas trangénicas CP ensayadas no se infectaron. En el caso del puente ihpCP 15, los 5 híbridos pie LR/puente 15/ copa wt, registraron resultados negativos en el diagnóstico de sus dos partes potencialmente susceptibles. De 4 híbridos ensayados con copa transgénica CP, 2 resultaron negativos tanto en el pie como en la copa y dos positivos en ambos sitios. Conclusiones: De este ensayo preliminar se extrae que las plantas ihpCP no son inmunes al virus sino solo resistentes, ya que el inóculo es capaz de escapar a zonas susceptibles y replicarse en ellas. La línea 15 parece presentar una mayor resistencia, ya que presenta menos escapes a pie y copa. Analizando el ensayo con puentes ihpCP 10 y copa CP se ve que la presencia del transgen hace que la señal de PTGS se propague hacia la copa volviéndola resistente al virus.