Test hipoosmótico combinado a la tinción de coomassie blue en espermatozoides de llama

CARRETERO MI; PIGRETTI C; BERTUZZI ML; FUMUSO FG

Spermova

Sociedad Peruana de Reproducción Animal

Lugar: Lima; Año: 2018 vol. 2 p. 129 - 132

2223-9375

La integridad de las membranas plasmática y acrosomal es de gran importanciapara determinar la capacidad fertilizante de los espermatozoides. Los objetivosde este trabajo fueron: 1) evaluar la funcionalidad de la membrana plasmáticaa través del tiempo mediante el test hipoosmótico (HOS) y 2) combinar la técnicade HOS con la tinción de Coomassie Blue (CB) para evaluar simultáneamente lafuncionalidad de membrana y la integridad acrosomal en espermatozoides desemen fresco de llama. Se obtuvieron 12 eyaculados de 6 machos medianteelectroeyaculación bajo anestesia general. Se realizó el test de endósmosis cony sin fijación en paraformadehído y evaluando a diferentes tiempos deconservación (0 hs sin fijar y 0, 2, 4 y 24 hs fijado). Una alícuota de la muestra fijada se procesó y se tiñó con CB. No se observaron diferencias significativas (p>0,05) en el porcentaje de espermatozoides con membranas funcionales al comparar la muestra no fijada y las muestras preservadas durante diferentes tiempos en la solución de fijación. Tampoco se observaron diferenciassignificativas (p>0,05) en el porcentaje de endósmosis en las muestras en las que sólo se realizó HOS y en las que se realizó HOS en combinación con CB. Esposible diferir el momento de la evaluación de la funcionalidad de membranade los espermatozoides de llama mediante la técnica de HOS de la colecta delsemen. La técnica dual (HOS + CB) permite evaluar en forma simultánea la funcionalidad de las membranas e integridad acrosomal en espermatozoides desemen fresco de llama, facilitando el trabajo a campo.