INVESTIGADORES
HEIN Gustavo Juan
congresos y reuniones científicas
Título:
Evaluación de la expresión de TGF-β1 bajo la influencia de ACTH durante el periodo preovulatorio en bovinos
Autor/es:
PEUST CS; BARALE J; AMWEG AN; SALVETTI NR; ORTEGA HH; MATILLER V; HEIN GJ
Lugar:
Esperanza (Santa Fe)
Reunión:
Jornada; V Jornada de Difusión de la Investigación y Extensión; 2017
Institución organizadora:
Facultad de Cs. Veterinarias (UNL)
Resumen:
La superfamilia del factor de crecimientotransformante-β (TGF-β) está compuesta por proteínas multifuncionales. Ciertosmiembros se expresanen el folículo ovárico, tanto en el ovocito como en las células somáticas quelo acompañan, ejerciendo una acción regulatoria autocrina y paracrina vinculadaa la maduración folicular. Enestudios previos hemos observado que la expresión de las isoformas TGF-β1, 2 y 3, se encuentra alterada enanimales con enfermedad quística ovárica (COD) y puede tener un rol importanteen patogénesis de la enfermedad. Las vacas lecheras de alta producción seencuentran expuestas a períodos de estrés a lo largo de las etapas productivasy reproductivas. Además, la activación del eje hipotálamo-hipofisario-adrenalpuede provocar trastornos a nivel reproductivo a través de las acciones de laACTH y el cortisol, afectando la secreción de la hormona liberadora degonadotropinas (GnRH). Trabajos previosde nuestro grupo han demostrado que la pared folicular bovina es capaz deresponder frente al estímulo de ACTH con cambios en la secreción de esteroides,incluyendo una mayor liberación de cortisol, lo que sugiere que este último poseeun rol local en la patogenia de la COD y en la función ovárica en bovinos. Porlo anteriormente expuesto, el objetivo de este trabajo fue evaluar la expresión proteica delligando TGF-β1 durante lasdiferentes etapas del desarrollo folicular en el ovario bovino, luego de la administración de ACTH duranteel proestro. Se utilizaron 12 vacas de la raza Holando Argentino,sobre las que se efectúo el protocolo de presincronizacion G-6-G para luego realizarla administración de dos dosis separadas (12 h) de PGF2α a los 7 días de laúltima administración de GnRH. Al momento de la primera administración de PGF2αlos animales se dividieron en dos grupos: a) ACTH (n=6), tratadas con100 UI de ACTH cada 12 h, y b) Control (n=6), tratadas con soluciónfisiológica cada 12 h. Para la obtención de los folículos preovulatorios serealizó la ovariectomía a las 36 h post-administración de PGF2α. Parala determinación de la expresión de TGF-β1 en las muestras obtenidas,se realizó la técnica de inmunohistoquímica indirecta de acuerdo alprotocolo descripto previamente por Matiller y col.1. Lacuantificación se realizó mediante análisis digital de imágenes (% de área inmunomarcada).En ambos grupos se evaluaron las capas de la granulosa y de la teca interna de losfolículos en crecimiento (primordiales, primarios, preantrales pequeños,preantrales grandes, antrales, antrales dominantes, atrésicos). Se corroboró laespecificidad del anticuerpo por Western blot. Los datos obtenidos fueronevaluados mediante el programa estadístico SPSS 11.0.1 para Windows. Se realizóun análisis de los datos obtenidos por inmunomarcación de los distintos tiposfoliculares aplicando pruebas paramétricas para la comparación de las distintascategorías foliculares mediante la prueba t de Student. Los resultados seexpresan como media ± desvío estándar (X ± DS). Los resultados mostraron una expresióncitoplasmática de TGF-β1 en todas las categorías foliculares estudiadas, tantoen células de la granulosa como en teca interna. La expresión proteica de TGF-β1en las células de la granulosa de folículos preantrales grandes de animalestratados fue mayor respecto al de los controles (p<0,05). Los resultadosmuestran una expresión constante de este ligando a lo largo de la foliculogénesispara ambos grupos evaluados, indicando la biodisponibilidad para cumplir su rolparacrino y autocrino en la regulación de la foliculogénesis, esteroidogénesis,entre otros. Resta la evaluación de otros ligandos de esta superfamilia y susreceptores los cuales en conjunto podrían cumplir un rol preponderante en lafunción ovárica normal así como en el desarrollo de distintos trastornos de lafertilidad en animales bajo estrés.