CARACTERIZACIÓN DE LOS POLIPÉPTIDOS DE LA GLOBULINA-P DE AMARANTO

QUIROGA ALEJANDRA V.; SCILINGO ADRIANA; CASTELLANI OSCAR F.; MARTÍNEZ E. NORA; AÑÓN MARÍA C.

Congreso; IX Congreso Argentino de Ciencia y Tecnología de los Alimentos.; 2002

La globulina-P (Gb-P) es una de las proteínas de reserva mayoritarias del amaranto. Presenta alta tendencia a la polimerización, características extractivas peculiares (se extrae con agua después de las globulinas 7S y 11S) y un perfil polipeptídico similar al de la globulina 11S. El objetivo del presente trabajo es avanzar en el conocimiento de la estructura cuaternaria de la Gb-P mediante la caracterización de sus polipéptidos, determinando masas moleculares y puntos isoeléctricos (pI). Para ello se utilizaron cromatografía de intercambio iónico (CII) y diversas técnicas electroforéticas PAGE, SDS-PAGE, electroforesis preparativa (EP) y bidimensional (EB) e isoelectroenfoque (IE).Utilizando CII (urea6M-DDT30mM) y EB: PAGE-urea6M SDS-PAGE se identificaron dos polipéptidos básicos (B1 22,1kDa y B2 23,6kDa), un polipéptido de 56kDa (P56), y tres polipéptidos ácidos A1 32,4kDa, A2 34,8kDa, A3 38,5kDa). Hemos determinado que los polipéptidos A1 y B1 y A3 y B2 se encuentran unidos por uniones disulfuro y no covalentes. Estos polipéptidos asociados y el P56 presentan similar característica ácido-base y diferente movilidad electroforética (A1B1/P56/A3B2). Para determinar los pI se separaron los polipéptidos mediante EP (urea6M, DDT30mM). Se determinaron tres pI diferentes para polipéptidos con igual masa molecular que el polipéptido A2 (A21:4,8; A22:5,1; A23:5,3); dos para B1 (B11:7,4; B12:7,8); dos para A1 (A11:5,0; A12:5,2) y uno para P56 (6,2). El/los pI de B2 coincide/n con los de B1. El punto isoeléctrico determinado para el P56, intermedio entre los básicos y los ácidos, apoya la hipótesis de que este polipéptido es un precursor de los dímeros AB. La diversidad de puntos isoeléctricos encontrados para los polipéptidos ácidos y básicos, indica que la Gb-P comparte con las globulinas de reserva el característico polimorfismo que éstas presentan.