INVESTIGADORES
CARDILLO Natalia Marina
congresos y reuniones científicas
Título:
Obtención y evaluación de productos de excreción- secreción (ES) de larvas de T. cati de huevos provenientes de materia fecal felina.
Autor/es:
CARDILLO NATALIA , CÉSPEDES GRACIELA*, SANTILLÁN GRACIELA* , SOMMERFELT IRMA
Lugar:
Foro Cultural Universitario de la Universidad Nacional del Litoral
Reunión:
Otro; XXIII Reunion Cientifica Anual Sociedad Argentina de Protozoología; 2009
Institución organizadora:
Sociedad Argentina de Protozoología
Resumen:
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Las especies Toxocara canis y cati tienen  potencial  zoonótico, representando un riesgo en Salud Publica. Existe poca evidencia del comportamiento biológico de T. cati y de la respuesta inmunológica de los hospedadores, puesto que en las ultimas décadas, la mayoría de los estudios han sido realizados sobre la especie T. canis. Los antígenos de excreción-secreción (ES) liberados por las larvas juegan un papel muy importante en el diagnostico de Toxocariosis humana. El objetivo del presente estudio fue obtener y evaluar los productos de ES de larvas de T. cati provenientes de huevos recuperados a partir de la materia fecal de gatos naturalmente infectados. Las larvas libres se obtuvieron por ruptura mecánica de los huevos y se colocaron en medio de cultivo para la producción de antígenos.  El sobrenadante fue recolectado semanalmente, se determinó una concentración proteica de 506,6 ug/ml por la técnica de Bradford. Los productos de ES/L2 total se analizaron mediante la técnica de electroforesis SDS-PAGE y por Western Blot. Se evaluó la respuesta al tratamiento de los mismos con y sin el agregado de B-Mercaptoetanol y en diferentes diluciones (10 %, 5 %, 2 %, 0.1 %, 0.05 %, 0.03 %). La membrana fue tratada con una dilución 1:100 de suero positivo a Toxocara spp. y una dilución del conjugado 1:6000. La corrida se realizó en una Mini Protean III (Biorad) y el revelado se realizó con Diaminobencidina (DAB). Se realizaron dos geles por prueba, destinándose uno para Western Blot y tinción de Coomassie, y el otro para la tinción con plata. Las muestras tratadas con B-Mercaptoetanol mostraron mejor definición de bandas que las no tratadas. En el Western Blot se observaron bandas de alrededor de 37 KDa, 50 KDa, una intermedia entre la de 50 y 93 KDa, de 93 y 115 KDa, coincidente con lo observado en la tinción de plata. De acuerdo a los resultados obtenidos el antigeno ES de T. cati demostró ser antigénico ya que por la técnica de Western blot se revelaron bandas de precipitación. Serán  necesarios futuros estudios para diferenciar T. canis y cati y poder establecer la frecuencia de infección de ambas especies en el humano. Por otro lado, la posibilidad de obtener antígenos de buena calidad y en alta concentración a partir de larvas de huevos obtenidos de materia fecal animal, será una herramienta de utilidad en la producción de antigenos para el diagnostico de Toxocariasis humana.