Obtención y caracterización de liposomas ultradeformables conteniendo Anfotericina B

ALTUBE MJ; PEREZ AP; CARNOVALE S; FINQUELEVICH J; MORILLA MJ; ROMERO EL

Simposio; TERCER SIMPOSIO ARGENTINO DE NANOMEDICINA; 2013

ASOCIACION ARGENTINA DE NANOMEDICINA

Obtención y caracterización de liposomas ultradeformables conteniendo Anfotericina B   María Julia Altube1, Ana Paula Perez1, Susana Carnovale2, Jorge Finquelievich2, María José Morilla1 y Eder Romero1 1Programa de Nanomedicinas, Universidad Nacional de Quilmes, BsAs, Arg. 2Centro de Micologia, Facultad de Medicina, IMPAM,UBA, BsAs, Arg.   maria.altube@becarios.unq.edu.ar     La Anfotericina B (AmB) es un farmaco poliénico, que se utiliza para tratamientos en infecciones fúngicas y leishmaniasis [1]. Debido a su baja solubilidad en agua su administración por vía intravenosa se realiza incorporándola en micelas, Fungizone® [2]. Se ha demostrado que esta formulación genera elevados niveles de toxicidad, principalmente nefrotoxicidad. Por este motivo se han diseñado diversas formulaciones lipídicas, como liposomas (Ambisome®), que permiten disminuir efectos secundarios. Los liposomas ultradeformables (LUD) formados por mezclas de fosfolípidos y un solubilizador de membrana son altamente flexibles y, a diferencia de los liposomas convencionales, cuando son aplicados tópicamente pueden impulsarse espontáneamente hacia la profundidad de la piel, en virtud de la existencia de un gradiente de hidratación entre el exterior del estrato corneo (SC) y el interior de la epidermis viable [3]. En este trabajo se diseñó una formulación de LUD conteniendo AmB la cual se caracterizó en cuanto a distribución de tamaño de partículas, potencial Z y morfología, exhibiendo tamaños promedios de 100 nm y potencial  Z de -3 mV. Mediante estudios espectroscópicos se observó que AmB se encuentra en estado monomérico interaccionando con la membrana liposomal. Se determinaron las concentraciones a las cuales LUD-AmB no genera citotoxicidad en líneas celulares derivadas de queratinocitos y de macrófagos. Mediante la técnica de Tape Stripping y HPLC se determinó que luego de una hora logran penetrar en el SC 0,8 ug/cm2 de AmB, tanto cuando se encuentra libre como incorporada en LUD, mientras que AmB en Ambisome no logra penetrar de manera detectable. A su vez se determinó la concentración mínima inhibitoria in vitro sobre cepas control de Candida albicans y parapsilosis, de AmB incorporada en LUD que fue de 0,06 y 0,125 ug/ml, de AmB libre 0,125-2 y 0,125-1 ug/ml y de Ambisome 0,25-05 y 0,5 ug/ml, respectivamente. En base a los resultados obtenidos, la formulación desarrollada se podría utilizar de forma tópica para el tratamiento de infecciones fúngicas cutáneas, como alternativa a los tratamientos intravenosos.   [1]Ellis D. 2002 Amphotericin B: spectrum and resistance, Journal of Antimicrobial Chemotherapy, suppl 1, 7-10. [2]Bates D.W., Su L., Yu D.T., Chertow G.M., Seger D.L., Gomes D.R., Dasbach E.J., Platt R. 2001 Mortality and cost of acute renal failure associated with amphotericin B therapy, Clin Infect Dis. 32 686-693 [3] Cevc G., Blume G. 1992 Lipid vesicles penetrate into intact skin owing to the transdermal osmotic gradients and hydration force, Biochim. Biophys., Acta 1104, 226?232.