Localización nuclear del factor forkhead box de clase o foxo3a (foxo), su asociación con b-catenina y smads y la participación de proteínas quinasas, en líneas de hepatocarcinoma celular (hcc) tratadas con interferón a (ifn)

CEBALLOS, MARIA PAULA; PARODY, JUAN PABLO; QUIROGA, ARIEL DARIO; CASELLA, MARÍA LAURA; FRANCES, DANIEL ELEAZAR ANTONIO; CARNOVALE, CRISTINA ESTER; ALVAREZ, MARIA DE LUJAN; CARRILLO, MARÍA CRISTINA

Congreso; LVIII Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica (SAIC); 2013

Previamente demostramos que IFN disminuye la proliferación e incrementa la apoptosis en líneas de HCC disminuyendo la interacción βcatenina/TCF4/Smads. En el núcleo, FoxO participa en proliferación y apoptosis e interactúa con βcatenina y Smads. FoxO es inhibido por Akt, IKKß (IKK) y Erk, que promueven su secuestro citosólico, mientras que se acumula en el núcleo tras ser fosforilado por JNK y p38MAPK (p38). Evaluamos los efectos de IFN en C3A y Huh7 sobre los niveles proteicos de FoxO total y fosforilado por Akt, las quinasas vinculadas a FoxO (inmunoblot) y su unión con βcatenina/Smads (co-inmunoprecipitación). Analizamos los niveles génicos y proteicos de genes blanco de FoxO (Real-Time q-PCR e inmunoblot). Estudiamos los niveles nucleares de FoxO (inmunoblot) en células Huh7 pretratadas con inhibidores de IKK, Erk y p38 y luego estimuladas con IFN. IFN redujo los niveles de FoxO fosforilado en extractos citosólicos (C3A -36%* Huh7 -49%*) y aumentó FoxO total en extractos nucleares (C3A +84%* Huh7 +72%*). IFN disminuyó los niveles de las formas activas de Akt (C3A -67%* Huh7 -61%*), IKK (C3A -22%* Huh7 -27%*) y Erk (C3A p-Erk1 -79%* p-Erk2 -56%* Huh7 p-Erk1 -46%* p-Erk2 -41%*) mientras que incrementó los niveles de las formas activas de JNK (C3A p-JNK2/3 +49%* p- JNK1 +64%* Huh7 p-JNK2/3 +45%* p-JNK1 +41%*) y p38 (C3A +59%* Huh7 +121%*). La inhibición de IKK y Erk estimuló la localización nuclear de FoxO inducida por IFN (+36%* y +45%* respectivamente) mientras que la inhibición de p38 bloqueó este fenómeno (-28%*). IFN aumentó la asociación de FoxO con βcatenina y Smads. La expresión de los genes blanco aumentó significativamente con IFN. *p