Estudio en el tiempo del proceso de apoptosis inducido por Interfer¨®n alfa-2b (IFN) v¨ªa TGF-b1 en hepatocitos de h¨ªgados preneopl¨¢sicos de rata

ALVAREZ, MARIA DE LUJAN; QUIROGA, ARIEL DARIO; RONCO, MARIA TERESA; OCHOA, JUSTINA OCHOA; MONTI, JUAN ALBERTO; PARODY, JUAN PABLO; FRANCES, DANIEL ELEAZAR ANTONIO; CARNOVALE, CRISTINA ESTER; CARRILLO, MAR¨ªA CRISTINA

Mar del Plata

Congreso; L Reunion Anual de la Sociedad Argentina de Investigacion Clinica; 2005

¡°Estudio en el tiempo del proceso de apoptosis inducido por Interfer¨®n alfa-2b (IFN) v¨ªa TGF-b1 en hepatocitos de h¨ªgados preneopl¨¢sicos de rata.¡± Alvarez ML, Quiroga AD, Ronco MT, Ochoa JE, Monti JA, Parody JP, Franc¨¦s DE, Carnovale CE, Carrillo MC. Medicina (Buenos Aires) 65, Supl II, pag 137, 2005. El IFN induce apoptosis en hepatocitos aislados de h¨ªgados preneopl¨¢sicos de rata v¨ªa la producci¨®n de TGF-¦Â1. Para investigar los mecanismos de apoptosis, hepatocitos aislados de h¨ªgados preneopl¨¢sicos fueron cultivados a 1, 4, 7, 20 y 24 hs con o sin IFN. En respuesta al IFN, los hepatocitos presentaron fragmentaci¨®n del ADN, la cual fue bloqueada con anti-TGF-¦Â1. Las actividades de caspasas -3 y -8 aumentaron significativamente a las 24 hs de cultivo (+40%* y +90%*, respectivamente). Adem¨¢s, a 1 h de cultivo el IFN v¨ªa el TGF-¦Â1 indujo aumento de especies reactivas del ox¨ªgeno (ROS) (+40%*). A las 4 hs se observ¨® p¨¦rdida del potencial de membrana mitocondrial (¦¤¦·) (-50%*) y liberaci¨®n del citocromo c (cit c) al citosol (+25%*), con un m¨¢ximo incremento a las 20hs de cultivo (+250%*). Los niveles de Bax aumentaron en mitocondria de un modo tiempo-dependiente a partir de las 4 hs (+35%*), con un m¨¢ximo a las 20 hs (+100%*), mientras que los niveles de Bcl-xL se mostraron disminuidos desde las primeras hs de cultivo (*p<0,05). Por otra parte, se observ¨® una translocaci¨®n retrasada de Bid a la mitocondria, que result¨® ser coincidente con la activaci¨®n de caspasa-8. En conclusi¨®n, el TGF-¦Â1 end¨®geno secretado bajo el est¨ªmulo con IFN, parece inducir la liberaci¨®n de cit c a trav¨¦s de un mecanismo relacionado con miembros de la familia Bcl-2, con un incremento de ROS y p¨¦rdida del ¦¤¦·. La prote¨ªna Bax ser¨ªa la responsable de la liberaci¨®n del cit c durante las primeras horas de la apoptosis inducida por el IFN v¨ªa el TGF-¦Â1, mientras que a tiempos posteriores Bid activado por caspasas amplificar¨ªa los eventos mitocondriales, favoreciendo la liberaci¨®n de m¨¢s cit c.