Desbalance redox induce el aumento de proteína pro-apoptótica Bax y liberación de citocromo c durante las primeras etapas de la regeneración hepática en ratas diabéticas. Efecto del tratamiento con insulina

FRANCES, DANIEL ELEAZAR ANTONIO; RONCO, MARIA TERESA; QUIROGA, ARIEL DARIO; PARODY, JUAN PABLO; MONTI, JUAN ALBERTO; ALVAREZ, MARIA DE LUJAN; CARRILLO, MARÍA CRISTINA

Mar del Plata

Congreso; LII Reunión Científica Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica (SAIC); 2007

Desbalance redox induce el aumento de proteína pro-apoptótica Bax y liberación de citocromo c durante las primeras etapas de la regeneración hepática en ratas diabéticas. Efecto del tratamiento con insulina.” Francés DE, Ronco MT, Quiroga AD, Parody JP, Monti JA, Alvarez ML, Carrillo MC, Carnovale CE. Medicina (Buenos Aires) 67 (Supl.III), pag 129, 2007. La hiperglicemia aumenta la producción celular de especies reactivas del oxígeno (ROS) que inducen apoptosis a través de la activación de Bax. Previamente demostramos que los ROS alteran el proceso de regeneración hepática. En el estado diabético existe un retardo en mencionado proceso. Objetivo: Evaluar el rol del estrés oxidativo en las primeras horas post-hepatectomía en ratas diabéticas y el efecto del tratamiento con insulina. Métodos: Ratas Wistar macho adultas fueron divididas en tres grupos: Control (C) (n=20), inyectadas i.p. con vehículo; Diabético (D) (n=20) inyectadas i.p. con estreptozotocina (SZ) 60mg/kg pc y Diabético+Insulina (D+I) (n=20) 15 días post-SZ, inyectadas s.c. con Insulina 30 UI/kg pc por día durante 15 días. A los 30 días C, D y D+I fueron subdivididos en: Sham (s) y Hepatectomizado (HP, hepatectomía del 65%). Los animales se sacrificaron a la hora (1) y a las 5 horas (5) post-cirugía. Resultados: Glicemia (g/l): C=1,1±0,1; D=4,3±0,4*; D+I=1,63±0,37. Porcentaje de glutation oxidado (Met. Tiezte): Cs=4,96±0,41; CHP1=8,07±0,45*; CHP5=10,61±0,71*; Ds=11,37±0,45*; DHP1=11,23±0,20*#; DHP5=8,91±0,71*; D+Is=6,76±0,46; D+IHP1=7,85±1,05; D+IHP5=9,89±1,74*. LPO (Mét. Ohkawa-HPLC, % de Cs): CHP1=134,2±6,6*; CHP5=151,7±6,6*; Ds=173,1±14,1*; DHP1=198,3±30,9*; DHP5=164,4±23,8*; D+Is=138,7±16,1*; D+IHP1=135,3±17,8; D+IHP5=142,9±10,7. Bax mitocondrial (Western Blot, % de Cs): CHP1=131,3±5,6*; CHP5=160,9±25,9*; Ds=176,8±14,3*; DHP1=187,5±31,1*; DHP5=178,9±15,5*; D+Is=119,4±39,4; D+IHP1=147,6±40,3; D+IHP5=148,3±35,6. Citocromo c citosólico (Western Blot, % de Cs): CHP1=156,5±23,2*; CHP5=179,2±31,2*; Ds=286,0±64,5*; DHP1=252,1±32,2*; DHP5=425,4±52,2*§; D+Is=194,9±29,7*; D+IHP1=321,2±52,3*; D+IHP5=317,3±48,2* (*p<0,05 vs Cs; §p<0,05 vs Ds; #p<0,05 vs D+Is). Conclusión: En el estado diabético se observó un aumento de ROS que produce activación de Bax y liberación de citocromo c; esta situación se revirtió sólo parcialmente con el tratamiento con insulina La hiperglicemia aumenta la producción celular de especies reactivas del oxígeno (ROS) que inducen apoptosis a través de la activación de Bax. Previamente demostramos que los ROS alteran el proceso de regeneración hepática. En el estado diabético existe un retardo en mencionado proceso. Objetivo: Evaluar el rol del estrés oxidativo en las primeras horas post-hepatectomía en ratas diabéticas y el efecto del tratamiento con insulina. Métodos: Ratas Wistar macho adultas fueron divididas en tres grupos: Control (C) (n=20), inyectadas i.p. con vehículo; Diabético (D) (n=20) inyectadas i.p. con estreptozotocina (SZ) 60mg/kg pc y Diabético+Insulina (D+I) (n=20) 15 días post-SZ, inyectadas s.c. con Insulina 30 UI/kg pc por día durante 15 días. A los 30 días C, D y D+I fueron subdivididos en: Sham (s) y Hepatectomizado (HP, hepatectomía del 65%). Los animales se sacrificaron a la hora (1) y a las 5 horas (5) post-cirugía. Resultados: Glicemia (g/l): C=1,1±0,1; D=4,3±0,4*; D+I=1,63±0,37. Porcentaje de glutation oxidado (Met. Tiezte): Cs=4,96±0,41; CHP1=8,07±0,45*; CHP5=10,61±0,71*; Ds=11,37±0,45*; DHP1=11,23±0,20*#; DHP5=8,91±0,71*; D+Is=6,76±0,46; D+IHP1=7,85±1,05; D+IHP5=9,89±1,74*. LPO (Mét. Ohkawa-HPLC, % de Cs): CHP1=134,2±6,6*; CHP5=151,7±6,6*; Ds=173,1±14,1*; DHP1=198,3±30,9*; DHP5=164,4±23,8*; D+Is=138,7±16,1*; D+IHP1=135,3±17,8; D+IHP5=142,9±10,7. Bax mitocondrial (Western Blot, % de Cs): CHP1=131,3±5,6*; CHP5=160,9±25,9*; Ds=176,8±14,3*; DHP1=187,5±31,1*; DHP5=178,9±15,5*; D+Is=119,4±39,4; D+IHP1=147,6±40,3; D+IHP5=148,3±35,6. Citocromo c citosólico (Western Blot, % de Cs): CHP1=156,5±23,2*; CHP5=179,2±31,2*; Ds=286,0±64,5*; DHP1=252,1±32,2*; DHP5=425,4±52,2*§; D+Is=194,9±29,7*; D+IHP1=321,2±52,3*; D+IHP5=317,3±48,2* (*p<0,05 vs Cs; §p<0,05 vs Ds; #p<0,05 vs D+Is). Conclusión: En el estado diabético se observó un aumento de ROS que produce activación de Bax y liberación de citocromo c; esta situación se revirtió sólo parcialmente con el tratamiento con insulina