Interacción entre las vías del Interferón alfa-2b (IFN-a2b) y del Factor de Crecimiento Transformante beta-1 (TGF-b1) en hepatocitos de hígados preneoplásicos de rata: participación del coactivador transcripcional p300

ALVAREZ, MARIA DE LUJAN; QUIROGA, ARIEL DARIO; PARODY, JUAN PABLO; RONCO, MARIA TERESA; FRANCES, DANIEL ELEAZAR ANTONIO; CARNOVALE, CRISTINA ESTER; CARRILLO, MARÍA CRISTINA

Mar del Plata

Congreso; LII Reunión Científica Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica (SAIC); 2007

Interacción entre las vías del Interferón alfa-2b (IFN-a2b) y del Factor de Crecimiento Transformante beta-1 (TGF-b1) en hepatocitos de hígados preneoplásicos de rata: participación del coactivador transcripcional p300. Alvarez ML, Quiroga AD, Parody JP, Ronco MT, Francés DE, Carnovale CE, Carrillo MC. Medicina (Buenos Aires) 67 (Supl.III), pag 240, 2007.   La activación de la vía del IFN-g suprime varias respuestas celulares estimuladas por TGF-b1 en células normales y neoplásicas. Se postula que esta modulación negativa se debe a que ambas vías compiten por interactuar con cantidades limitantes del coactivador p300. Por otra parte, en nuestro laboratorio observamos que en hepatocitos de hígados preneoplásicos el IFN-a2b estimula la producción de TGF-b1 y que entre ambas vías se da una interacción positiva. Con el objetivo de evaluar el rol de p300 en dicho modelo, trabajamos con hepatocitos de ratas sometidas a un modelo de preneoplasia experimental. Las células se cultivaron a 1, 4, 7, 15, 20 y 24 horas, sin y con IFN-a2b y además con IFN-a2b más inhibidores de la vía del TGF-b1 (SB431542 y anti-TGF-b1). Confirmamos la activación de la vía del IFN-a con el aumento del transductor intracelular Stat1 fosforilada (+150%*) a partir de 1 hora de cultivo. Los niveles de Smad2/3 fosforiladas (mediadores intracelulares de TGF-b1) aumentaron desde las 15 horas (+85%*) en hepatocitos tratados con  IFN-a2b, indicando activación de la vía. Los inhibidores utilizados bloquearon completamente dicha activación. En membranas plasmáticas de hepatocitos tratados con IFN-a2b no se observaron cambios en los niveles del receptor para el IFN-a, pero sí un aumento del receptor para TGF-b1 (+60%*, desde las 15 horas), junto con un aumento de su mensajero (+100%*). Los estudios de inmunoprecipitación con p300 mostraron que en células tratadas con IFN-a2b, p300 es capaz de interactuar con Stat1 y Smad2/3, no mostrándose como factor limitante para la activación de las vías. La medición de los niveles celulares de p300 en lisados de hepatocitos provenientes de hígados normales y preneoplásicos mostró un  incremento de la proteína en estos últimos (+130%*, *p<0,05). En conclusión, los resultados demuestran que p300 no resulta ser un factor limitante, dado que en la preneoplasia la abundancia de la proteína permite la activación de ambas vías.