La vía de señalización de p38 está involucrada en la apoptosis inducida por Interferón-2b (IFN-2b) en hepatocitos provenientes de hígados preneoplásicos de rata

QUIROGA, ARIEL DARIO; ALVAREZ, MARIA DE LUJAN; PARODY, JUAN PABLO; RONCO, MARIA TERESA; FRANCES, DANIEL ELEAZAR ANTONIO; CARNOVALE, CRISTINA ESTER; CARRILLO, MARÍA CRISTINA

Mar del Plata

Congreso; LII Reunión Científica Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica (SAIC); 2007

La vía de señalización de p38 está involucrada en la apoptosis inducida por Interferón-a2b (IFN-a2b) en hepatocitos provenientes de hígados preneoplásicos de rata. Quiroga AD, Alvarez ML, Parody JP, Ronco MT, Francés DE, Carnovale CE, Carrillo MC. Medicina (Buenos Aires) 67 (Supl.III), pag 192, 2007. En trabajos previos demostramos que el IFN-a2b induce apoptosis en hígados preneoplásicos de ratas a través de la perturbación del estado redox celular. Esto induce al complejo enzimático NADPH oxidasa, lo que gatilla la síntesis y secreción de TGF-b1. La Proteína Kinasa Activada por Mitógenos p38 es sensible al estrés citotóxico, como el estrés oxidativo, y juega un rol importante en la regulación de la supervivencia en distintos tipos celulares. El objetivo de este trabajo fue evaluar el papel de p38 en el mecanismo de apoptosis descripto. Para ello se realizaron cultivos de hepatocitos de ratas iniciadas-promovidas: a) sin tratar, b) con IFN-a2b, c) con IFN-a2b + ASC, d) con IFN + anti-TGF-β1 y e) con IFN-a2b + SB203580 (inhibidor de la vía de señalización de p38). Transcurridos distintos tiempos de cultivo se realizaron diferentes mediciones. Apoptosis (Annexina V-FITC): el tratamiento con IFN-a2b indujo un aumento de apoptosis de 150%* (*p<0,05). El co-tratamiento con SB203580 bloqueó dicho aumento. p-p38 (Western Blot): p38 se fosforila a los 30 min luego del tratamiento con IFN-a2b, a la hora de cultivo vuelve a sus valores basales y a las 8 h 30 min vuelve a fosforilarse. Esta última fosforilación se inhibe cuando al medio de cultivo se agrega anti-TGF-β1. p47phox (Western Blot): la subunidad citoplasmática de la NADPH oxidasa migra hacia la membrana plasmática a los 20 min de cultivo con IFN-a2b y se mantiene en el tiempo hasta las 15 hs. En presencia de anti-TGF-β1 la actividad de la enzima comienza a decaer hacia las 7 hs de cultivo. Estos datos sugieren que tanto el IFN-a2b agregado al medio de como el TGF-β1 segregado por los hepatocitos inducen la activación (fosforilación) de la kinasa p38. Esta estaría involucrada en la decisión de muerte celular en los hepatocitos provenientes de hígados preneoplásicos.