IFN-alfa induce apoptosis vía TGF-beta1 a través de especies reactivas del oxígeno (ROS) en hepatocitos de hígados preneoplásicos de rata

QUIROGA, ARIEL DARIO; ALVAREZ, MARIA DE LUJAN; RONCO, MARIA TERESA; PARODY, JUAN PABLO; FRANCES, DANIEL ELEAZAR ANTONIO; MONTI, JUAN ALBERTO; OCHOA, JUSTINA OCHOA; CARNOVALE, CRISTINA ESTER; CARRILLO, MARÍA CRISTINA

Mar del Plata

Congreso; L Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica; 2005

“IFN-alfa induce apoptosis vía TGF-beta1 a través de especies reactivas del oxígeno (ROS) en hepatocitos de hígados preneoplásicos de rata.” Quiroga A, Alvarez ML, Ronco MT, Parody JP, Francés D, Monti J, Ochoa E, Carnovale C, Carrillo MC. Medicina (Buenos Aires) 65, Supl II, pag 137, 2005.   Hemos demostrado que en hepatocitos aislados de hígados preneoplásicos cultivados con IFN se produce apoptosis por un mecanismo mediado por TGFb1, y la misma va acompañada por una disminución de las defensas antioxidantes. En otras células tratadas con TGFb1, otros autores demostraron disminución de glutation (GSH) por oxidación y por alteración de la enzima limitante de sus síntesis, gamma-glutamilcistein ligasa (GCL). Nuestro objetivo fue evaluar si el IFN es capaz de modificar el metabolismo del GSH durante la ejecución de la apoptosis vía TGFb1 en hepatocitos de hígados preneoplásicos. Las ratas fueron sometidas a un modelo de preneoplasia experimental y los hepatocitos se cultivaron a distintos tiempos (1, 3, 7, 20 y 24h): A) sin IFN, B) con IFN, C) con IFN + anti- TGFb1, D) con IFN + ácido ascórbico. Los niveles de ROS aumentaron significativamente (p<0,05) a 1 h de cultivo en el grupo B (+41%). En B los niveles de GSH disminuyeron significativamente a las 7 h de cultivo (-41,89%), y en C y D GSH no varió. GSH total en el medio de cultivo aumentó, haciéndose significativo a las 7h, con prevalencia de la especie oxidada. A las 24 h se observó el clivaje de la subunidad catalítica de GCL (GCLC) en B (western blot). C y D no variaron. El análisis de mRNA para GCL (RT-PCR) mostró una disminución significativa de los niveles del mensajero de GCLC a partir de las 3 h (-35%). Los niveles del mensajero de la subunidad moduladora (GCLM) no se alteraron en B. En A, C y D no se observaron alteraciones significativas. El TGFb1 producido por el IFN produciría un aumento de ROS y este aumento sería responsable de los efectos observados en el metabolismo del GSH, el que actuaría como scavenger de los ROS producidos tempranamente. La rápida eliminación de GSH de los hepatocitos hacia el medio se produciría para mantener el equilibrio redox, suceso que no resulta suficiente para evitar la muerte celular por apoptosis.