LA IMPORTANCIA DEL CONTEXTO CELULAR EN EL EFECTO DEL FÁRMACO HIPOLIPEMIANTE LOMITAPIDE SOBRE EL DESARROLLO TUMORAL

COMANZO, CG; QUIROGA, AD

Congreso; Sociedad de Biología de Rosario; 2023

Lomitapide es un fármaco aprobado para su uso como agente hipolipemiante para el tratamiento de la hipercolesterolemia familiar homocigótica debido a su acción como inhibidor específico de la proteína microsomal de transferencia de triglicéridos (MTP). MTP se expresa en células que sintetizan y secretan lipoproteínas conteniendo apolipoproteína B, principalmente hepatocitos y enterocitos. La inhibición de MTP bloquea el ensamblaje y secreción de lipoproteínas de muy baja densidad (VLDL), lo que conduce a una disminución de los niveles plasmáticos de lipoproteínas de baja densidad (LDL). En estudios previos realizados en modelos de hepatocarcinogénesis química in vivo, se demostró un aumento en los niveles plasmáticos de triglicéridos y colesterol, un aumento en la secreción de VLDL y un aumento en los niveles de expresión de MTP en hígado, lo que indica que esta proteína podría tener un rol en el desarrollo del cáncer hepático. En base a esto, decidimos evaluar el efecto del lomitapide sobre el desarrollo del cáncer de hígado en diferentes modelos experimentales. En primer lugar, se evaluó la sensibilidad al lomitapide de líneas celulares de hepatocarcinoma (HCC) humano, Huh7 y HepG2, mediante el ensayo de MTT; se observó una disminución dosis-dependiente de la viabilidad celular y se determinó el valor de IC50 (concentración que inhibe el 50% del crecimiento celular) para cada línea celular: 0,81±0,04 μM para Huh7 y 1,04±0,12 μM para HepG2. Para evaluar el efecto del fármaco en el desarrollo tumoral in vivo, se utilizó un modelo de xenoinjertos en ratones nude. Se observó un aumento significativo del peso y volumen de los tumores en los animales del grupo “lomitapide”. Es decir, se observaron efectos opuestos del lomitapide in vivo respecto del modelo in vitro. Para entender esta aparente contradicción, y dada la influencia del microambiente tumoral en la respuesta celular a fármacos, se evaluó la sensibilidad de las líneas de HCC al inhibidor de MTP en un modelo de cocultivo con células no parenquimatosas LX2 y EA.hy926. Los cocultivos resultaron más resistentes al tratamiento respecto de los monocultivos de líneas de HCC (IC50: 1,57±0,24 μM, para Huh7; 1,65±0,28 μM, para HepG2). Esto sugiere que algún factor soluble secretado por las células no parenquimatosas podría estar involucrado en la estimulación de las células de HCC. Por ello, se obtuvieron medios condicionados (MC) de las células LX2 y EA.hy926 tratadas con lomitapide. Ambas líneas de HCC presentaron mayor sobrevida cuando fueron incubadas con lomitapide en MC proveniente de células LX2 (IC50: 1,49±0,19 μM para Huh7; 1,60±0,32 μM para HepG2), sin cambios evidentes en la supervivencia celular cuando las células de HCC fueron incubadas con lomitapide en MC proveniente de células EA.hy926 (IC50: 0,92±0,15 μM para Huh7; 1,10±0,17 μM para HepG2). Finalmente, se evaluaron los niveles de IL-8/CXCL8 y del factor endotelial de crecimiento vascular (VEFG) en los MC. Los niveles estas citoquinas en el MC proveniente de las células LX2 incubadas con lomitapide fueron significativamente mayores que en los MC de las células Huh7, HepG2 y EA.hy926 incubadas con lomitapide. Los resultados se expresaron como valor de la media ± SE. La significancia de las diferencias halladas se puso a prueba mediante un test ANOVA de una vía o t de Student, según resulte adecuado. Los resultados obtenidos muestran un posible rol de MTP en el desarrollo tumoral hepático. Además, evidencian la importancia del ambiente tumoral al evaluar la respuesta celular a un determinado fármaco.