DESARROLLO DE LINEAS CELULARES RESISTENTES A SORAFENIB PARA ESTUDIAR LA QUIMIORRESISTENCIA EN EL HEPATOCARCINOMA CELULAR

PALMA, NF; QUIROGA, AD; CEBALLOS, MP

Congreso; Sociedad de Biología de Rosario; 2023

Es fundamental contar con modelos más realistas para estudiar posibles estrategias de quimioterapia para el hepatocarcinoma celular (HCC). La quimiorresistencia (QR) es un fenómeno que contrarresta la eficacia de ciertos fármacos, como el sorafenib (SFB); uno de los quimioterápicos de primera línea utilizados para el tratamiento del HCC. La proliferación celular descontrolada y la sobreexpresión de transportadores de tipo ABC en las células de HCC se asocian a la QR. Objetivo: establecer líneas celulares resistentes a SFB para utilizarlas como modelo de estudio de la QR en el HCC. Metodología: se cultivaron dos líneas celulares modelo de HCC humanas, Huh7 y HepG2 (líneas parentales), con concentraciones crecientes de SFB durante 6 meses, para establecer las líneas resistentes (Huh7-SR y HepG2-SR, respectivamente). Una vez generadas, las líneas resistentes se cultivaron en medio con SFB, para mantener la resistencia adquirida. Mediante el ensayo de MTT se estimó la viabilidad celular en las líneas parentales y resistentes, obteniéndose curvas dosis-respuesta, a partir de las cuales se calcularon los valores de IC50 para SFB (concentración del fármaco que inhibe el 50% del crecimiento celular). Mediante Western Blot se analizó la expresión de proteínas vinculadas con la proliferación celular (ciclina D1 y PCNA) y de algunos transportadores de tipo ABC (MRP3, Pgp, BCRP). Resultados: ambas líneas celulares resistentes presentaron valores de IC50 más altos para SFB que sus respectivas líneas parentales (Huh7-SR=5,9 μM* vs. Huh7=2,8 μM y HepG2-SR=7,7 μM* vs. HepG2=1,9 μM). En ambas líneas resistentes se observaron además mayores niveles respecto a sus respectivas líneas parentales de PCNA (Huh7-SR=+54,2%* y HepG2-SR=+155,7%*), de ciclina D1 (Huh7-SR=+285,6%* y HepG2-SR=+256,4%*), de Pgp (Huh7-SR=+178,2%* y HepG2-SR=+451,9%), de MRP3 (Huh7-SR=+249,2%* y HepG2-SR=+263%*), de BCRP (Huh7-SR=+140%* y HepG2-SR=+85,1%*). *p<0,05 vs. línea parental. Conclusión: se logró generar líneas celulares resistentes a SFB con ambas líneas modelo de HCC. Estos resultados implican un avance en la búsqueda de modelos apropiados para el estudio del HCC en un contexto de QR, así como de los mecanismos moleculares vinculados a este fenómeno.